大腸桿菌發(fā)酵的問題
各位老師同學(xué)們好,我現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)遇到了些麻煩。就是使用大腸桿菌BL21在25℃發(fā)酵表達(dá)一種蛋白酶(長時(shí)間發(fā)酵,要發(fā)酵液中的酶),發(fā)酵70h后發(fā)現(xiàn)發(fā)酵液中總是出現(xiàn)跟毛線團(tuán)一樣的聚集物,好像什么東西沒溶解。重新轉(zhuǎn)化感受態(tài)之后再表達(dá)依然是這種情況。但是轉(zhuǎn)化其他表達(dá)載體后發(fā)酵就沒有這樣的現(xiàn)象。應(yīng)該可以排除是培養(yǎng)基的問題和菌被污染問題,這個(gè)聚集物是酶的包涵體嗎還是什么。另:測的酶活也很低,請(qǐng)老師不吝解答。
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京公網(wǎng)安備 11010802022153號(hào)
是分泌的出來的酶,還是胞內(nèi)重組表達(dá)
建議重新轉(zhuǎn)化重組菌株
周期過長,蛋白部分變性,會(huì)有絮狀沉淀析出。建議改變發(fā)酵工藝,摸索最佳工藝,