線性鏈置換擴(kuò)增SDA,擴(kuò)增曲線熒光下降求解釋
最近在做SDA,原理如下,聚合酶和切口酶共同作用線性擴(kuò)增原理如圖1,sybr green ii監(jiān)測反應(yīng)。
正常情況擴(kuò)增及背景如圖2。
當(dāng)加入10倍量的不相關(guān)其它鏈后,擴(kuò)增分別為圖3,圖4,圖3加入序列長度為62,圖4加入序列長度為16。
求各位大神解釋圖3,圖4。
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最近在做SDA,原理如下,聚合酶和切口酶共同作用線性擴(kuò)增原理如圖1,sybr green ii監(jiān)測反應(yīng)。
正常情況擴(kuò)增及背景如圖2。
當(dāng)加入10倍量的不相關(guān)其它鏈后,擴(kuò)增分別為圖3,圖4,圖3加入序列長度為62,圖4加入序列長度為16。
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京公網(wǎng)安備 11010802022153號(hào)
系統(tǒng)加入過載的背景核酸后,會(huì)干擾蛋白酶和靶標(biāo)核酸的結(jié)合,使反應(yīng)無法進(jìn)行或信號(hào)失真,
可以嘗試加入單鏈DNA結(jié)合蛋白(SSB)以排除多余核酸的干擾