請(qǐng)教用過(guò)PCR引物和探針的達(dá)人，現(xiàn)在國(guó)產(chǎn)的質(zhì)量如何？
現(xiàn)在國(guó)內(nèi)有很多的DNA合成公司，如金斯瑞、上海生工、金唯智等。我搜到了一些前些年的評(píng)論，2010年前反饋的信息中因?yàn)橐锏膯?wèn)題導(dǎo)致的PCR失敗發(fā)生的事情還不少，不知道現(xiàn)在國(guó)產(chǎn)的質(zhì)量水平提高了嗎？因?yàn)镻CR引物問(wèn)題導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)失敗事件概率怎么樣？
想請(qǐng)教用過(guò)PCR引物和探針的達(dá)人，現(xiàn)在這些國(guó)產(chǎn)的PCR引物和探針質(zhì)量水平如何，純度和堿基缺失率都怎么樣，實(shí)際交付的產(chǎn)品能達(dá)到國(guó)標(biāo)的水準(zhǔn)嗎？國(guó)產(chǎn)的里面哪家質(zhì)量比較好？跟進(jìn)口的相比有多大差距？
另外，在收到產(chǎn)品后，你們會(huì)自己再做一下質(zhì)檢嗎？如果做的話會(huì)用哪些方法？
請(qǐng)達(dá)人賜教！
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京公網(wǎng)安備 11010802022153號(hào)
很早的時(shí)候用Invitrogen的引物，近些年都是用的國(guó)產(chǎn)，像捷瑞、泓迅等。就是常規(guī)PCR，會(huì)更考慮價(jià)格和送貨速度，總體來(lái)說(shuō)能夠滿足實(shí)驗(yàn)需求，偶爾會(huì)出現(xiàn)堿基缺失，或者簡(jiǎn)并引物偏好性太強(qiáng)等問(wèn)題。訂制引物時(shí)可以自己選擇純化方式，當(dāng)然要求越高，收費(fèi)越高。我們只用最基礎(chǔ)的純化方式，收到產(chǎn)品直接就用了，沒(méi)做過(guò)質(zhì)檢。
感謝應(yīng)助！另外還想求教一下簡(jiǎn)并引物偏好性太強(qiáng)是指什么問(wèn)題。現(xiàn)在國(guó)產(chǎn)的引物價(jià)格一般都是多少？還有您是否用過(guò)探針，探針的質(zhì)量要求跟PCR引物有不同嗎？或者說(shuō)在購(gòu)買(mǎi)探針的時(shí)候有哪些方面需要注意。
簡(jiǎn)并引物是指引物中有N（A+T+C+G）、S（G+C）等堿基，目的是對(duì)該位點(diǎn)進(jìn)行飽和突變，偏好性強(qiáng)是隨機(jī)挑取單克隆測(cè)序時(shí)，多個(gè)測(cè)序結(jié)果完全相同�，F(xiàn)在引物一般是0.4元/bp，只用最基礎(chǔ)的純化方式。我沒(méi)有用過(guò)探針，但是探針要求的純化方式好像比較高。具體的注意事項(xiàng)可以請(qǐng)教用過(guò)的朋友或者引物合成公司，他們可以給出一些建議
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