熒光共振能量轉(zhuǎn)移探究蛋白互作
目的蛋白A和B已分別連接上CFP與YFP，轉(zhuǎn)入細胞內(nèi)并已表達，目前使用共聚焦顯微鏡能夠分別看到青色及黃色熒光
但是只使用青色熒光的激發(fā)光時，只能夠看到青色熒光，而無法看到黃色熒光，有的樣品能夠看到青色熒光減弱 但是怎么能夠看到能量轉(zhuǎn)移產(chǎn)生的黃色熒光從而判斷A和B之間有互作呢？
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能看到他們co-localization嗎？ 如果在細胞內(nèi)分布高度co-localization，是很強的證據(jù)吧
做FRET要定量計算，把兩個不同波長的發(fā)射光強度做除法，并進行大量細胞的統(tǒng)計。FRET的變化程度有時候沒那么牽?/p>