一種熱穩(wěn)定性高的酶,熱保溫后酶活力提高現(xiàn)象正常嗎?
各位老師好,
我現(xiàn)在在做一種淀粉酶,在測(cè)熱穩(wěn)定性時(shí),發(fā)現(xiàn)這種酶在室溫放置1 h、50℃、60℃和70℃保溫1 h或更長(zhǎng)時(shí)間,然后在70℃溫度下(最適反應(yīng)溫度)測(cè)酶活發(fā)現(xiàn)保溫后的酶都比常溫下放置酶的酶活高,并且保溫時(shí)間越長(zhǎng),酶活力呈現(xiàn)升高趨勢(shì),酶活可提高200%以上。請(qǐng)問這種淀粉酶的酶活力變化現(xiàn)象是正常的嗎,是否有類似的很多酶都是這種現(xiàn)象?大部分酶的活力我發(fā)現(xiàn)都是隨著保溫時(shí)間延長(zhǎng),活力下降的。
謝謝!
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京公網(wǎng)安備 11010802022153號(hào)
酶是從冷凍的母液里解凍的還是干粉配的?如果是干粉的話可能是因?yàn)闆]有完全溶解。
(1)有沒有可能酶里面有抑制劑,但是加熱能讓抑制劑滅活?
(2)酶里面有水解酶,加熱讓水解酶失活?
(3)酶原在加熱后轉(zhuǎn)變成有活性的酶?
謝謝您的回復(fù),我的酶是異源表達(dá)后純化得到的純酶液,是液態(tài)的
謝謝老師您的回復(fù),我的酶是異源表達(dá)后純化得到的純酶液,緩沖體系是Tris-HCl,應(yīng)該是沒有抑制劑的。有可能是加熱后酶的活力被激活,我想知道這種加熱保溫后能夠被激活的現(xiàn)象是一種常見的現(xiàn)象嗎?
不常見。一般而言,加熱會(huì)讓蛋白酶失活。即使是耐熱的酶,加熱后有部分蛋白失活,活性變低。(高溫下,分子運(yùn)動(dòng)加劇,導(dǎo)致部分蛋白變性)
加熱后,活性更高,不是活力被激活,活性更高(hyperactive)可能更確切一些。和這個(gè)類似的例子有,熱啟動(dòng)Taq酶,加熱后,修飾或抗體失活,有活性的酶釋放出來,表現(xiàn)就是加熱酶的活性出來了
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您好,請(qǐng)問這個(gè)酶的情況您后面做原因分析了嗎?我現(xiàn)在也遇到了類似情況,熱穩(wěn)定性數(shù)據(jù)看起來就很奇怪
方便提供反應(yīng)的具體情況(實(shí)驗(yàn)方式,對(duì)比數(shù)據(jù))嗎? 我想理解一下這種情況發(fā)生的原因。 可以隱藏酶和底物信息,但是反應(yīng)條件和操作細(xì)節(jié)盡量提供吧。