LC-MS方法檢測(cè)植物激素,儀器:賽默飛LTQ Obitrap
剛剛接觸這個(gè)方向,好多都不太懂,請(qǐng)求各位大佬的幫助,謝謝大家!
1、測(cè)激素標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備做工作曲線,十一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品的混標(biāo),上機(jī)只能測(cè)出六個(gè)物質(zhì),濃度加到50微克每毫升也只能測(cè)到六個(gè)物質(zhì),這是什么原因呢?
2、上機(jī)色譜柱是C18,流動(dòng)相是99%甲醇,我看這個(gè)上機(jī)條件很少見問(wèn)了檢測(cè)老師,他說(shuō)是我的標(biāo)準(zhǔn)品都溶于甲醇,所以拿高濃度甲醇把柱子上所以的東西都給洗脫下來(lái),但是我看文獻(xiàn)都是流動(dòng)相用乙腈,這兩個(gè)流動(dòng)相有什么差別呢?哪個(gè)更合適呢?
3、對(duì)我的樣品中試提取了植物激素,甲醇甲酸水作為提取溶劑,用C18固相小柱純化,濃縮復(fù)溶上機(jī),但是只檢測(cè)到了儀器最敏感的兩個(gè)植物激素反式玉米素和6-BA,這兩個(gè)激素測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)可以檢測(cè)到皮克級(jí)別,其他的檢測(cè)不到是提取方法的問(wèn)題嗎?還是上機(jī)條件或儀器問(wèn)題,求大家給寫解決辦法或思路,謝謝大家!
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1.標(biāo)準(zhǔn)品達(dá)到微克每毫升級(jí)別!?確定嗎?這個(gè)濃度下你們用的是直接掃描模式?不是MRM? 2.流動(dòng)相甲醇響應(yīng)一般比乙腈高點(diǎn),系統(tǒng)壓力也高一點(diǎn),乙腈洗脫快點(diǎn),具體可以測(cè)試然后決定。3,樣本測(cè)出來(lái)只有兩個(gè)一方面可能是方法有問(wèn)題,因?yàn)槟愕臉?biāo)準(zhǔn)品也沒有全部出峰,還有可能是前處理有問(wèn)題,要一個(gè)個(gè)排除
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