選的目的基因保守結(jié)構(gòu)域分別正向和反向插入多克隆位點(diǎn)MSC1和MSC2，中間有一段內(nèi)含子序列，想使其成為發(fā)夾結(jié)構(gòu)，從而干擾目的基因的表達(dá)。想請問在構(gòu)建載體的時候需要正向和內(nèi)含子以及反向序列形成一個完整的編碼區(qū)嗎？它們中間有終止密碼子可以嗎？
還想問一下基因沉默是選一個基因的保守結(jié)構(gòu)域就可以，還是說得是基因的全長？
感謝大家的回復(fù)，太謝謝啦

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