分光光度計(jì)的讀數(shù)超過(guò)20,稀釋10倍后卻只有0.2,這是為什么?
我們實(shí)驗(yàn)室的分光光度計(jì)的吸光度最大可達(dá)到20,但是我的東西在一定波長(zhǎng)下超過(guò)了20,而我稀釋10倍后,讀數(shù)只有0.2了,請(qǐng)問(wèn)這是為什么?我不需要知道里面的物質(zhì)濃度,只想看吸光度隨反應(yīng)時(shí)間的變化
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我們實(shí)驗(yàn)室的分光光度計(jì)的吸光度最大可達(dá)到20,但是我的東西在一定波長(zhǎng)下超過(guò)了20,而我稀釋10倍后,讀數(shù)只有0.2了,請(qǐng)問(wèn)這是為什么?我不需要知道里面的物質(zhì)濃度,只想看吸光度隨反應(yīng)時(shí)間的變化
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超過(guò)了范圍就不準(zhǔn)了,自然就不遵循簡(jiǎn)單的倍數(shù)關(guān)系
超出測(cè)量的線性范圍了,可以做個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線看一看
別說(shuō)20,就是超過(guò)2都已經(jīng)不可信了,希望再認(rèn)真看看分光光度計(jì)原理,儀器直接測(cè)到的是光強(qiáng)度,通過(guò)對(duì)比透射光強(qiáng)和入射光強(qiáng)得到透光率T,再取-log值換算為吸光度A(即OD),當(dāng)OD為2時(shí),T已經(jīng)只有1%,當(dāng)OD為3時(shí),T已經(jīng)到千分之一,此時(shí)基本與機(jī)器暗電流造成的誤差在一個(gè)水平,故根本不可信,更別說(shuō)OD到20了。通常認(rèn)為OD在0.1到1之前可信度比較好,且與濃度的線性最佳。
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有可能如樓上所說(shuō),解決方法 是做標(biāo)曲,而且最好你的標(biāo)曲的吸收值落在某范圍(具體多少忘記了哈)
其次 不排除存在AIE 效應(yīng)