細(xì)菌/培養(yǎng)基/蛋白質(zhì)含量
請問有人測過細(xì)菌在培養(yǎng)過程中培養(yǎng)基的蛋白質(zhì)含量的變化嗎?細(xì)菌培養(yǎng)一段時間后,離心取上清,我用考馬斯亮藍(lán)測上清液的OD595nm,發(fā)現(xiàn)OD值沒什么變化,是為什么呢?謝謝
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請問有人測過細(xì)菌在培養(yǎng)過程中培養(yǎng)基的蛋白質(zhì)含量的變化嗎?細(xì)菌培養(yǎng)一段時間后,離心取上清,我用考馬斯亮藍(lán)測上清液的OD595nm,發(fā)現(xiàn)OD值沒什么變化,是為什么呢?謝謝
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這個很難說明問題吧,培養(yǎng)基里面的蛋白會被分解利用,但是細(xì)菌死亡之后也會釋放蛋白質(zhì),這樣測只能看個大概吧,感覺說明不了問題,除非培養(yǎng)基中的蛋白質(zhì)含量培養(yǎng)前后有明顯的差別
雖然細(xì)菌死亡會釋放蛋白質(zhì),但理論上蛋白質(zhì)消耗量比釋放量多,畢竟細(xì)菌在生長,對吧?但是按照這個理論,我測不出蛋白質(zhì)含量的變化,是因?yàn)闄z測方法的問題嗎?還是離心完要進(jìn)行蛋白質(zhì)純化
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蛋白質(zhì)不需要純化,直接測就行。蛋白濃度怎么樣?不會是在本底反應(yīng)的誤差范圍內(nèi)吧?如果不是的話,會不會是大分子蛋白,菌株根本不能利用或利用量很小
培養(yǎng)基的蛋白質(zhì)菌株肯定能利用吧?我沒有測具體的濃度,直接測了od值,因?yàn)橹皇窍肟匆粋變化的趨勢。做蛋白表達(dá)的時候不是要做蛋白純化再測濃度嗎,我在想是不是因?yàn)榕囵B(yǎng)基里的其他物質(zhì)影響了蛋白質(zhì)的檢測。
培養(yǎng)基的蛋白質(zhì)菌株肯定能利用吧?我沒有測具體的濃度,直接測了od值,因?yàn)橹皇窍肟匆粋變化的趨勢。做蛋白表達(dá)的時候不是要做蛋白純化再測濃度嗎,我在想是不是因?yàn)榕囵B(yǎng)基里的其他物質(zhì)影響了蛋白質(zhì)的檢測。
一般培養(yǎng)基的氮源就是無機(jī)氮和類似蛋白胨這種蛋白水解物,都是多肽或者氨基酸,很少有提供完整蛋白配置培養(yǎng)基的吧