酵母表達(dá)中的點(diǎn)種,具體怎么操作,涂到g418-YPD做菌落pcr就沒(méi)有條帶是為什么
沒(méi)有師兄師姐帶,各種遇到問(wèn)題。最近在用酵母GS115表達(dá)我的蛋白,電轉(zhuǎn)涂板到MD上,再點(diǎn)種到2mg/ml的g418-YPD上。但是不知道點(diǎn)種具體怎么操作,之前是把單菌落溶解到20微升的雙蒸水中,取1微升點(diǎn)到板子上,不知道大家都是怎么做的
還有為什么從md挑到g418-ypd上后,做菌落pcr就沒(méi)有條帶了,大概要挑多少的單菌落才能挑到自己的目的基因哎?
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