畢赤酵母組成型表達(dá)外源蛋白
用畢赤酵母GS115表達(dá)外源蛋白，為組成型表達(dá)，大概在96h左右OD漲到了300左右，還有繼續(xù)生長的趨勢，但是取上清檢測酶活和蛋白質(zhì)含量，和搖瓶是一樣的，基本上相當(dāng)于只長菌不表達(dá)，有什么可能的原因？有沒有哪位大神遇到過類似的情況，交流一下，謝謝！
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京公網(wǎng)安備 11010802022153號
你實驗過程、誘導(dǎo)劑是什么、培養(yǎng)工藝怎么做的，都不知道，別人怎么給你提供建議。
不好意思，新手
我先挑取GS115單菌落到Y(jié)PD上再接種到BMGY培養(yǎng)基上，長到一定濃度后按照接種量10%接種到發(fā)酵罐中，1.2L發(fā)酵罐，700毫升裝液量，發(fā)酵培養(yǎng)基為BSM，初始pH控制在5，溶氧控制在20-50，初始攪拌速度300rpm，前期較高溶氧，OD漲到200多的時候溶氧控制在30左右，組成型表達(dá)，所以一直補加甘油，后期通過補加甘油速率和攪拌轉(zhuǎn)速控制溶氧，最后OD漲到了400左右，但是檢測上清蛋白含量和酶活都很低，和搖瓶差不多
所有很奇怪，實在想不出哪出了問題
，
是不是要加誘導(dǎo)劑才表達(dá)了？或者基因上下游連反了
你用的什么啟動子