做過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染和流式的大佬幫幫忙
前輩同仁們,最近剛開始接觸細(xì)胞的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染和流式,用lipo2000做了hela細(xì)胞的轉(zhuǎn)染,空載質(zhì)粒是pcDNA3.1加GFP標(biāo)簽的,48小時(shí)后做流式發(fā)現(xiàn)細(xì)胞早凋率上升了二三十倍,重復(fù)實(shí)驗(yàn)和單因素實(shí)驗(yàn)都做了,就是想不通為什么轉(zhuǎn)染這個(gè)空載質(zhì)粒會(huì)影響細(xì)胞凋亡,各位前輩有用過這種質(zhì)粒的嗎?有什么好的建議嗎?
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京公網(wǎng)安備 11010802022153號(hào)
轉(zhuǎn)染試劑就是會(huì)有點(diǎn)兒毒性,質(zhì)粒里也會(huì)帶些內(nèi)毒素。
如果比較介意這個(gè)情況,可以使用無內(nèi)毒素的質(zhì)粒提取試劑盒和低毒性的轉(zhuǎn)染試劑(比如TRANSIT-LT1)
轉(zhuǎn)染試劑都會(huì)有一些毒性,只是有時(shí)候比較低看不出來而已。
可以檢測一下支原體,有時(shí)候細(xì)胞雖然有支原體污染,但是平時(shí)養(yǎng)得好好的看形態(tài)和增殖速率也看不出問題。但是一旦有一些壓力存在(比如轉(zhuǎn)染),細(xì)胞自身的壓力達(dá)到一定閾值,就會(huì)有凋亡
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