求助結(jié)晶紫染色法測(cè)定細(xì)菌生物膜具體步驟
剛剛接觸細(xì)菌生物膜的新手求助具體步驟(菌株是蠟樣芽胞桿菌):
1 100微升培養(yǎng)液接種10微升菌液,37℃靜置培養(yǎng)24h;
2 吸出培養(yǎng)液,加入200微升PBS洗滌3次(每次都會(huì)吸出渾濁的物質(zhì),是生物膜嗎?怎樣才能避免破壞膜呢?);
3 100微升甲醇固定15min,吸出甲醇;
4 100微升結(jié)晶紫溶液染色(結(jié)晶紫溶液到底應(yīng)該用多大的濃度,有1%和0.1%的濃度,該選哪個(gè)?染色要多久?有文獻(xiàn)說5min還有說15min。)
5 100微升95%乙醇脫色(脫色時(shí)間要多久?)
6 測(cè)OD值(到底測(cè)590nm還是595nm還是540nm?)
測(cè)OD590時(shí),酶標(biāo)儀結(jié)果還出了星號(hào)咋回事,新手剛剛接觸生物膜,啥也不懂,求大神指教!
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您好,請(qǐng)問現(xiàn)在問題解決了嗎,我在養(yǎng)大腸桿菌的生物膜,也遇到了類似的問題,方便請(qǐng)教嗎
不好意思,太久沒上線回復(fù)遲了,現(xiàn)在問題還是沒有解決,我們可以溝通一下
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加聯(lián)系方式嗎??我也想請(qǐng)教一下
我這邊正好看到一篇碩士畢業(yè)論文,污水處理廠中微塑料表面的生物膜與抗生素基因特征研究,其中就是用結(jié)晶紫染色法測(cè)生物膜量,建議你看一下文獻(xiàn),問問作者
請(qǐng)問樓主,生物膜測(cè)定之后準(zhǔn)備做什么深入研究嗎……我也是做這個(gè)實(shí)驗(yàn)來著,做完之后就不知道該繼續(xù)做些什么了