這個(gè)實(shí)驗(yàn)卡了很久了，目的條帶P不出來(lái)。
我可以確定以下幾個(gè)方面沒(méi)問(wèn)題。
第一，cdna沒(méi)有問(wèn)題，這個(gè)用其它引物驗(yàn)證過(guò)。
第二，我操作沒(méi)有問(wèn)題，我做其它引物都是成功的。
第三，所用試劑沒(méi)問(wèn)題，用的hifi酶。
除此之外，我已經(jīng)設(shè)計(jì)了三對(duì)引物了，tm值大致都在55度到60度，上下游引物相差沒(méi)有超過(guò)四度，每一對(duì)都從48度到65度進(jìn)行了驗(yàn)證。均沒(méi)有成功，甚至連雜帶都看不到，就是啥都沒(méi)有。
我人傻了，第一次遇到這種硬茬。我覺(jué)得跟引物有關(guān)系，因?yàn)槌跏夹蛄芯陀行┏稜僮�，但是�?yīng)該不至于啥也跑不出來(lái)呀，各位大哥幫忙看看，有哪些地方可能我沒(méi)照顧到。謝謝大哥們

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