求問用重疊延伸PCR怎么構缺失突變質粒,打算構缺失42bp的突變質粒,現(xiàn)在已經設計了突變引物,但具體操作不知道該怎么做,新手小白求幫助 返回小木蟲查看更多
跟做定點突變一樣的方法
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跟做定點突變一樣的方法
參考這個試劑盒的說明書:https://www.agilent.com/cs/library/usermanuals/public/200523.pdf
但是不用買他的試劑盒,用自己有的高保真pcr酶就行。
如果做不出來可以考慮在要刪除的區(qū)域用任意限制性內切酶先切一下(如果有特異性位點的話),會大大提高效率
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