每日一問(wèn)(融合標(biāo)簽)
融合大標(biāo)簽一般都是在N端,先讓標(biāo)簽蛋白表達(dá)來(lái)促進(jìn)目的蛋白可溶,那HIS和一些小標(biāo)簽蛋白是放在目的蛋白的N端還是C端,依據(jù)是啥?融合在C端如何有“降解帶”,只有可能是目的蛋白降解產(chǎn)生,不可能是轉(zhuǎn)錄中止,蛋白會(huì)比在N端純一點(diǎn)嗎?問(wèn)了同事同事說(shuō),翻譯一般從N端開(kāi)始,蛋白折疊已經(jīng)開(kāi)始,如果貿(mào)然將N端融合標(biāo)簽可能會(huì)導(dǎo)致更多不可溶蛋白,有的人說(shuō)融合在C端如果表達(dá)降解了,你還不知道你的蛋白有沒(méi)有表達(dá),如果融合在N端至少可以知道蛋白表達(dá)了。額,這可咋辦?
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表達(dá)意外終止
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沒(méi)有固定的規(guī)矩,GST一般放N端,His放N端和C端都可以,