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十四_14

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19樓: Originally posted by tayifeita at 2016-09-08 14:59:22
如果你搖菌用的培養(yǎng)基和涂板子用的培養(yǎng)基不同可以清洗一下，相同的話(huà)倒是無(wú)所謂。...

這樣啊~~
謝謝你！！

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21樓2016-09-08 16:20:47

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renren2004a

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6樓: Originally posted by 十四_14 at 2016-09-08 08:33:07
涂板菌液的量也做了不同的 20微升，50微升，100微升，500微升，哪個(gè)都沒(méi)長(zhǎng)…………我還拿空載做了對(duì)照也沒(méi)長(zhǎng) 但是同時(shí)做的空載轉(zhuǎn)DH5α的對(duì)照長(zhǎng)了菌難道我的感受態(tài)有問(wèn)題？？可都是新買(mǎi)的...

將感受態(tài)涂布不加抗生素的平板看看有沒(méi)有生長(zhǎng)。

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22樓2016-09-08 17:18:10

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wacx33

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23樓2016-09-08 22:44:44

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cm14704019

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我估計(jì)感受態(tài)有問(wèn)題，你可以做個(gè)對(duì)照看看

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24樓2016-09-08 23:55:08

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warkan

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25樓2016-09-08 23:57:23

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Wawa521

禁蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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26樓2016-09-09 01:02:29

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armigera

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西門(mén)吹雪170: 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖交流 2016-09-09 22:34:05

首先，你確定DH5alpha中提取的質(zhì)粒沒(méi)問(wèn)題，這說(shuō)明你前面的克隆做對(duì)了，不用考慮連接或者是載體的問(wèn)題。其次，BL21表達(dá)感受態(tài)不能被轉(zhuǎn)化，但對(duì)照組的DH5alpha沒(méi)問(wèn)題，說(shuō)明是BL21出了問(wèn)題。那么問(wèn)題找到了。如果你確定這個(gè)是BL21或者你能弄到BL21的話(huà)，可以自己做感受態(tài)，步驟和制作DH5alpha一樣，都是很傳統(tǒng)的分子實(shí)驗(yàn)。如果弄不到菌株，你可以跟老板說(shuō)，你的表達(dá)片段里有很多稀有氨基酸，BL21不能滿(mǎn)足需要，需要更換其他菌株，能說(shuō)通的話(huà)這事就成了。祝好運(yùn)！

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27樓2016-09-09 01:58:15

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dehong1573

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【答案】應(yīng)助回帖

感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1

自己做吧，公司做的感受態(tài)不一定比你做的好，很簡(jiǎn)單的~搖菌、冰浴、收菌、加CaCl2、收菌、重懸、分裝，你也可以拿去賣(mài)

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科學(xué)永無(wú)止境,只有合作共享才能更好地……

28樓2016-09-09 08:56:49

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小李1314

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7樓: Originally posted by 十四_14 at 2016-09-08 08:36:30
BL21感受態(tài)都是新買(mǎi)的

昨天又做了一次依舊沒(méi)有長(zhǎng)菌落但是轉(zhuǎn)空載的DH5α長(zhǎng)了而空載轉(zhuǎn)BL21沒(méi)長(zhǎng) 是不是說(shuō)明我的感受態(tài)是有問(wèn)題的？？...

應(yīng)該是沒(méi)有問(wèn)題吧

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29樓2016-09-09 09:49:26

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更戀秋風(fēng)

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引用回帖:

10樓: Originally posted by 十四_14 at 2016-09-08 10:20:38
怎是太坑了  新買(mǎi)的就有問(wèn)題……

我這是小公司  提出再買(mǎi)新的領(lǐng)導(dǎo)估計(jì)不樂(lè)意了  摳的要死……

如果想要自己制備  請(qǐng)問(wèn)如何制備呢？謝謝你~~~...

就是普通制作感受態(tài)的方法。一般做化轉(zhuǎn)感受態(tài)就夠了

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30樓2016-09-09 15:49:00

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