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qsx04152006

木蟲(chóng) (知名作家)

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最好是純化

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11樓2010-06-29 12:18:57

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xiaoru2010

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引用回帖:

Originally posted by dianaofyezi at 2010-06-29 10:38:54:
如果直接是PCR產(chǎn)物測(cè)序肯定是需要純化的，否則結(jié)果不僅僅是重疊峰的問(wèn)題了。
如果是克隆的話，一般都是建議純化的。純化后可以將PCR產(chǎn)物里面的緩沖體系改變，增加做克隆的成功率等。但是如果有些人比較有經(jīng)驗(yàn)的看 ...

請(qǐng)問(wèn)一下凝膠回收就等于是純化ma？不用再用專(zhuān)門(mén)的純化試劑盒再處理一遍了吧？

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12樓2010-07-02 16:04:07

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dianaofyezi

金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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對(duì)于有非特異性的條帶來(lái)說(shuō)膠回收就是純化和濃縮了DNA。如果用專(zhuān)門(mén)的試劑盒純化是根據(jù)你后續(xù)試驗(yàn)來(lái)確定的，有些試驗(yàn)需要DNA的濃度和純度都比較高，用專(zhuān)門(mén)的純化KIT可以達(dá)到這個(gè)效果。

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52187644

13樓2010-07-02 16:37:54

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snzydong

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純化后可以去除PCR反應(yīng)buffer中的殘留液

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14樓2010-07-06 19:24:45

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空谷幽風(fēng)

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dhd997(金幣+1):謝謝交流。 2010-07-07 08:14:03

片段最好用凝膠回收試劑盒進(jìn)行純化，因?yàn)镻CR片段中的小片段連接效率是更高的，會(huì)嚴(yán)重影響你的目的條帶的連接效率

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a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?

15樓2010-07-06 23:54:25

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天外飛仙→順

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不需要純化，，，PCR沒(méi)多大影響

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我無(wú)法改變自己的出生，但我可以決定自己的命運(yùn)：命中注定我是一個(gè)王者，我必須拿出王者的風(fēng)范！�。�

16樓2010-07-06 23:59:39

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