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stardu

新蟲 (初入文壇)

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引用回帖:

6樓: Originally posted by hyacinth326 at 2012-12-29 15:59:37
估計(jì)你酶切后的載體濃度太低了，你可以提質(zhì)粒的時(shí)候濃縮一下，這個(gè)載體拷貝數(shù)很低很低，好像是1~5copy/cell，慢搖的時(shí)候我都是30度，100rpm，1h，用SOC復(fù)蘇的

你好！請(qǐng)問(wèn)這個(gè)轉(zhuǎn)化是用電擊轉(zhuǎn)化到DH5α中還是直接就可以常規(guī)熱激轉(zhuǎn)化到DH5α中？
希望你看到后能回復(fù)我，謝謝，萬(wàn)分感謝！

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11樓2013-01-07 22:40:08

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hyacinth326

金蟲 (正式寫手)

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【答案】應(yīng)助回帖

★ ★ ★ ★ ★
stardu: 金幣+5, ★有幫助 2013-01-11 17:16:41

搖菌過(guò)程是慢搖的，200rpm太高了，這個(gè)質(zhì)粒我所有的培養(yǎng)都是30度，連接酶多加點(diǎn)沒(méi)關(guān)系的，你沒(méi)有磷酸化的載體自連都不長(zhǎng)的話，那就不是連接體系比例的問(wèn)題了，估計(jì)是連接的問(wèn)題，感受態(tài)細(xì)胞的問(wèn)題，轉(zhuǎn)化的問(wèn)題，都有可能，一項(xiàng)一項(xiàng)排除吧

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12樓2013-01-10 11:13:13

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bainaling

鐵桿木蟲 (正式寫手)

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樓主已經(jīng)把這個(gè)弄好了吧，可否指點(diǎn)我一下我也弄好了好久還沒(méi)弄好。。。。

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回復(fù)此樓

13樓2014-07-07 10:40:06

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