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胖墩兒Adolph

銅蟲(chóng) (初入文壇)

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【答案】應(yīng)助回帖

引用回帖:

19樓: Originally posted by 曼舞流蘇 at 2014-06-13 09:38:04
什么情況？我每次提取RNA都會(huì)有白色沉淀啊，難道那個(gè)白色沉淀不是RNA？？？？最近一次提取干燥時(shí)候干燥時(shí)間太久了，前3個(gè)管子里面的白色沉淀居然不見(jiàn)了，變成透明的了，求原因！�。�！是不是被降解了？難道白做了？ ...

我也遇到這個(gè)情況了，但是我硬著頭皮反轉(zhuǎn)錄，PCR了一下，出來(lái)了所需要的基因，而且內(nèi)參Cq 16，其他都很好。干燥太久就得好好吹一吹，讓RNA 溶解

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我不愛(ài)上課，但很愛(ài)學(xué)習(xí)！

21樓2014-06-13 14:22:36

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曼舞流蘇

新蟲(chóng) (小有名氣)

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21樓: Originally posted by 胖墩兒Adolph at 2014-06-13 14:22:36
我也遇到這個(gè)情況了，但是我硬著頭皮反轉(zhuǎn)錄，PCR了一下，出來(lái)了所需要的基因，而且內(nèi)參Cq 16，其他都很好。干燥太久就得好好吹一吹，讓RNA 溶解...

謝謝！我就蓋上蓋子使勁上下晃動(dòng)了一會(huì)，希望沒(méi)事吧，下周一開(kāi)始PCR擴(kuò)增，希望結(jié)果滿(mǎn)意。祈禱中。。。

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22樓2014-06-13 20:44:36

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園園補(bǔ)補(bǔ)

鐵蟲(chóng) (小有名氣)

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14樓: Originally posted by anmengqu at 2014-05-31 09:22:47
應(yīng)該是有蛋白的沉淀，我以前在做RNA提取的時(shí)候，一旦出現(xiàn)白色沉淀過(guò)多一般情況下RNA提出了的質(zhì)量都不好。用氯仿再多抽提一次，但要保證操作要訪RNA酶，因?yàn)槊慷嗖僮饕淮尉驮黾右环直晃廴镜奈ｋU(xiǎn)，不要到最后蛋白除掉 ...

原因找到了，是trizol試劑被污染了，現(xiàn)在好了

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23樓2014-06-14 10:14:26

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園園補(bǔ)補(bǔ)

鐵蟲(chóng) (小有名氣)

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引用回帖:

19樓: Originally posted by 曼舞流蘇 at 2014-06-13 09:38:04
什么情況？我每次提取RNA都會(huì)有白色沉淀啊，難道那個(gè)白色沉淀不是RNA？？？？最近一次提取干燥時(shí)候干燥時(shí)間太久了，前3個(gè)管子里面的白色沉淀居然不見(jiàn)了，變成透明的了，求原因�。。�！是不是被降解了？難道白做了？ ...

有白色沉淀很正常啊，我的是很明顯的一坨白色絮狀物的沉淀，很顯然我的不是想要得到的RNA白色沉淀

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24樓2014-06-14 10:16:06

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huanzhizhu

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【答案】應(yīng)助回帖

引用回帖:

19樓: Originally posted by 曼舞流蘇 at 2014-06-13 09:38:04
什么情況？我每次提取RNA都會(huì)有白色沉淀啊，難道那個(gè)白色沉淀不是RNA？？？？最近一次提取干燥時(shí)候干燥時(shí)間太久了，前3個(gè)管子里面的白色沉淀居然不見(jiàn)了，變成透明的了，求原因�。。。∈遣皇潜唤到饬�？難道白做了？ ...

同感，基本每次提取RNA都會(huì)出現(xiàn)某些管子白色沉淀，看了此樓瞬間表示傷不起！

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25樓2014-06-14 11:31:26

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曼舞流蘇

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24樓: Originally posted by 園園補(bǔ)補(bǔ) at 2014-06-14 10:16:06
有白色沉淀很正常啊，我的是很明顯的一坨白色絮狀物的沉淀，很顯然我的不是想要得到的RNA白色沉淀...

這是什么個(gè)意思？難道那白色沉淀不是RNA？那是什么雜質(zhì)？

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26樓2014-06-14 11:38:18

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曼舞流蘇

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25樓: Originally posted by huanzhizhu at 2014-06-14 11:31:26
同感，基本每次提取RNA都會(huì)出現(xiàn)某些管子白色沉淀，看了此樓瞬間表示傷不起！...

額額，

傷不起是什么個(gè)情況嘛？難道白色沉淀不是RNA

？越是沒(méi)有表示越純？瞬間凌亂了。。。。

反正我前三個(gè)管子在棄上清時(shí)候發(fā)現(xiàn)有一坨白色沉淀，干燥時(shí)候沒(méi)有及時(shí)觀察，干燥的久了一些，我一看，里面東西沒(méi)有了，變透明了，嚇了我一跳，目測(cè)這三管不大好溶解啊，

后面幾組就及時(shí)溶解了，后天跑PCR，希望結(jié)果良好。

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27樓2014-06-14 11:44:08

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25樓: Originally posted by huanzhizhu at 2014-06-14 11:31:26
同感，基本每次提取RNA都會(huì)出現(xiàn)某些管子白色沉淀，看了此樓瞬間表示傷不起！...

剛接觸做PCR，

求耐心指教，不要鄙視偶的無(wú)知，

謝謝！

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28樓2014-06-14 11:51:19

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園園補(bǔ)補(bǔ)

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26樓: Originally posted by 曼舞流蘇 at 2014-06-14 11:38:18
這是什么個(gè)意思？難道那白色沉淀不是RNA？那是什么雜質(zhì)？

...

我的是一坨白色絮狀沉淀，測(cè)出來(lái)的比值不是很對(duì)，我的應(yīng)該不是RNA

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29樓2014-06-16 09:45:22

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as321616

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【答案】應(yīng)助回帖

★ ★
園園補(bǔ)補(bǔ)(西門(mén)吹雪170代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-11-12 20:31:54

以前遇到過(guò)這種問(wèn)題。這樣處理，加入氯仿離心分層后，吸取上清需要小心，不要吸到中層白色的東西或下層紅色有機(jī)相，否則pellet會(huì)有不溶于水的白色沉淀。如果樓主不介意提取量，取一部分上清就可以了，剩下的不要，這樣可以避免蛋白或多糖污染。用這種方法，260/230 一般都能到1.9以上。
希望能幫到。

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30樓2014-06-16 13:20:47

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