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qaz139687(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2015-01-08 20:48:24

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8樓: Originally posted by qaz139687 at 2015-01-08 18:42:34
酶是不是就是PCR體系加的taq酶，那在設(shè)計(jì)引物前段著么加酶切位點(diǎn)的特定序列呢...

taq酶是DNA連接酶，在PCR體系中是為了以引物為模板，擴(kuò)增出你所要的目的片段。
至于你說的前面加的酶切位點(diǎn)是為了PCR拿到目的片段以后，進(jìn)行下一步操作時(shí)用的。得到的目的片段要和別的操作載體進(jìn)行連接，這時(shí)候才用到內(nèi)切酶，進(jìn)行酶切。
這些東西你找本分子生物學(xué)或者基因工程的書好好看看，都有的。

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11樓2015-01-08 19:30:43

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10樓: Originally posted by Carpedime at 2015-01-08 19:18:31
首先，你到底想干嘛呢？

搖菌之后的菌液，需要做菌液PCR,酶切，然后送測(cè)嗎

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12樓2015-01-08 21:41:52

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【答案】應(yīng)助回帖

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3樓: Originally posted by qaz139687 at 2015-01-07 22:04:08
這個(gè)我知道我的意思是在什么情況下酶切，是不是我設(shè)計(jì)的引物就相當(dāng)于這把剪刀？...

不是的(⊙o⊙)哦，酶切是指用酶切斷指定的位點(diǎn)，如果是剪刀的話，應(yīng)該是說那個(gè)酶。。

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13樓2015-01-08 22:24:08

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不好意思，看成雷切了

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飛躍無極限鳥會(huì)返自然

14樓2015-01-08 22:46:42

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【答案】應(yīng)助回帖

感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1

酶切當(dāng)然是用酶切開你的目的片段了，酶是你的剪刀。
一般設(shè)計(jì)引物的時(shí)候會(huì)加上酶切位點(diǎn)，也就是你下剪刀的地方。

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15樓2015-01-08 22:55:38

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【答案】應(yīng)助回帖

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12樓: Originally posted by qaz139687 at 2015-01-08 21:41:52
搖菌之后的菌液，需要做菌液PCR,酶切，然后送測(cè)嗎...

酶切是用特定的內(nèi)切酶識(shí)別特定的序列并在特定的位點(diǎn)打斷磷酸二酯鍵，揍醬～

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16樓2015-01-09 00:07:58

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【答案】應(yīng)助回帖

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引用回帖:

大哥，引物不是剪刀，內(nèi)切酶才是。。。。

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追隨自己的心！不要做讓自己后悔的事！

17樓2015-01-09 12:35:43

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【答案】應(yīng)助回帖

qaz139687同學(xué)，你怎么到處問些這么基本的問題，都研究生了吧？
酶切本科課本有講過吧？有些基本的問題可以先問下度娘然后再來求助，效率更高一些！
你設(shè)計(jì)引物拉出你要的片段那不叫酶切，酶切要有固定酶切位點(diǎn)的，不是隨便什么序列都可以切開的。酶切一般做重組載體的時(shí)候用的，把我的一個(gè)DNA片段和一個(gè)載體同時(shí)酶切，然后兩個(gè)產(chǎn)物有相同酶切末端，就可以在酶的作用下粘合。最常用的時(shí)候是做原核表達(dá)的時(shí)候，你不是有個(gè)基因鰓表達(dá)最高嗎，你可以查看原核表達(dá)步驟，對(duì)這個(gè)基因進(jìn)行原核表達(dá)，分析功能。

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18樓2015-03-30 17:07:42

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14樓: Originally posted by Aska飛鳥 at 2015-01-08 22:46:42
不好意思，看成雷切了

高，雷切貌似我還知道一點(diǎn)。

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采菊東籬下，悠然見南山。

19樓2015-03-30 18:19:56

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lxzk

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11樓: Originally posted by 翼在天 at 2015-01-08 19:30:43
taq酶是DNA連接酶，在PCR體系中是為了以引物為模板，擴(kuò)增出你所要的目的片段。
至于你說的前面加的酶切位點(diǎn)是為了PCR拿到目的片段以后，進(jìn)行下一步操作時(shí)用的。得到的目的片段要和別的操作載體進(jìn)行連接，這時(shí)候才 ...

這位童鞋，taq是DNA聚合酶不是連接酶，不會(huì)是被傳染了吧？

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20樓2015-03-31 09:05:09

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