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傾雨晨

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9樓: Originally posted by w911227 at 2015-10-23 17:37:25
測(cè)一下絮狀物的多糖和蛋白含量不就好了，一般濃縮的過(guò)程中產(chǎn)生沉淀是不是你濃縮溫度太高導(dǎo)致的蛋白變性啊，醇沉的過(guò)程中會(huì)沉淀蛋白和糖，比如40%的乙醇沉淀出來(lái)的大多是蛋白，75%左右多糖會(huì)沉淀出來(lái)，如果絮狀物不溶 ...

您好，無(wú)意中看見(jiàn)您的回復(fù)，上面所講的75的乙醇是直接加入乙醇的濃度呢還是加入乙醇之后又算上多糖溶液重新計(jì)算的濃度呢？重新計(jì)算的話是換算之后的70的乙醇濃度，在加入的時(shí)候是不是用的是濃度為95的乙醇？謝謝

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11樓2016-11-12 09:40:47

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w911227

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11樓: Originally posted by 傾雨晨 at 2016-11-12 09:40:47
您好，無(wú)意中看見(jiàn)您的回復(fù)，上面所講的75的乙醇是直接加入乙醇的濃度呢還是加入乙醇之后又算上多糖溶液重新計(jì)算的濃度呢？重新計(jì)算的話是換算之后的70的乙醇濃度，在加入的時(shí)候是不是用的是濃度為95的乙醇？謝謝
...

算的是加入乙醇之后又算上多糖溶液重新計(jì)算的濃度，加入的時(shí)候用95%或者無(wú)水乙醇都沒(méi)有問(wèn)題。

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苦難的日子終將逝去，但強(qiáng)者卻永存

12樓2016-11-12 10:59:57

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傾雨晨

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12樓: Originally posted by w911227 at 2016-11-12 10:59:57
算的是加入乙醇之后又算上多糖溶液重新計(jì)算的濃度，加入的時(shí)候用95%或者無(wú)水乙醇都沒(méi)有問(wèn)題。...

用無(wú)水乙醇的話，濃度最高也只有75而已呢

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13樓2016-11-12 12:38:21

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【答案】應(yīng)助回帖

多糖的醇沉應(yīng)該用75%左右的酒精，后學(xué)色素和蛋白質(zhì)的去除，可以用丙酮和50%左右的乙醇。后續(xù)的多糖純化可以過(guò)大孔樹(shù)脂，依據(jù)不同的分子量進(jìn)行分離。當(dāng)然做活性如果要求更高的話，還可能用到制備液相和核磁。

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14樓2016-11-16 16:39:57

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z周先生

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【答案】應(yīng)助回帖

樓主，你應(yīng)該先除蛋白，然后再醇沉，因?yàn)槲业难芯糠较蛞彩嵌嗵沁@的，一半多糖都是水溶性的，你這個(gè)不是水溶性的，應(yīng)該是蛋白變性的沉淀物。在純化的過(guò)程中先加一步除蛋白，然后再醇沉濃縮，不知道樓主濃縮是不是用的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，現(xiàn)在可以考慮一下超濾離心。前提得知道你這個(gè)多糖的分子量大小，因?yàn)槌瑸V離心可以避免溫度的升高是多糖降解。

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優(yōu)秀不夠，要無(wú)法代替

15樓2016-11-29 10:48:05

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2樓: Originally posted by 大臉喵喵喵 at 2015-10-21 10:00:14
醇沉的沉淀才是多糖吧多糖一般不溶于高濃度醇

想問(wèn)一下，得到的濃縮液可以直接加進(jìn)無(wú)水乙醇直到想要的濃度嗎

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16樓2017-04-19 08:55:13

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ckyak

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您好，打擾您了，我在做多糖提取，遇到一些問(wèn)題，想請(qǐng)教一下您

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17樓2018-12-03 18:22:56

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15樓: Originally posted by z周先生 at 2016-11-29 10:48:05
樓主，你應(yīng)該先除蛋白，然后再醇沉，因?yàn)槲业难芯糠较蛞彩嵌嗵沁@的，一半多糖都是水溶性的，你這個(gè)不是水溶性的，應(yīng)該是蛋白變性的沉淀物。在純化的過(guò)程中先加一步除蛋白，然后再醇沉濃縮，不知道樓主濃縮是不是 ...

你好，我想請(qǐng)問(wèn)一下您？我今天用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮多糖后然后進(jìn)行醇沉。我一加入乙醇就出現(xiàn)了各種絮狀物，請(qǐng)問(wèn)您有遇到過(guò)這種情況嗎？是不是我加乙醇的時(shí)候加得太猛了？一下子就倒進(jìn)去了~哈有就是我看到好多文獻(xiàn)他們都沒(méi)有除蛋白這一步驟，我是不是要加多這一步��？是用sevag法嗎？我后續(xù)要用多糖做動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，是個(gè)sevag法會(huì)對(duì)這個(gè)產(chǎn)生不好的影響嗎？

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18樓2019-07-19 16:41:31

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【答案】應(yīng)助回帖

我們最近也在做多糖，也出現(xiàn)了同樣的情況，醇沉后的沉淀是黃棕色的，重新水溶后離心下來(lái)不溶的沉淀是白色的，上清是黃色的，這時(shí)候多糖應(yīng)該就已經(jīng)溶在水里了；剩下的不溶的沉淀雖然不溶于水，用考馬斯亮藍(lán)試著測(cè)了一下，主成分應(yīng)該是蛋白，但是不確定會(huì)不會(huì)有糖蛋白。

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19樓2020-11-27 09:36:18

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