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81631731金蟲 (小有名氣)
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[求助]
含過表達WNT基因的慢病毒轉染hMSC熒光很弱 已有1人參與
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最近在轉過表達的WNT9A的慢病毒到hMSC，第一次設定MOI為50,100,150，作用24h換液，發(fā)現(xiàn)熒光很弱，于是將MOI翻倍補加慢病毒。48h后熒光還是很弱，而且轉染率也很低。但是細胞也長滿了就接著往下傳代，熒光依然較弱。后來放假就么有管了，等節(jié)后看看貌似熒光率有上升，但是細胞推擠厲害狀態(tài)不好，沒有接著往下傳代（當時真應該再試試的......），而且把曝光時間調長一點貌似也還行（因為當時還轉了eGFP，所以心里就默認那個熒光強度才是正常的，這也是考慮不周全的地方）。但是后來又重復了一下MOI，同時領導說作用時間太長影響細胞狀態(tài)，所以又試著將作用時間改為8h，完全沒有熒光啊啊�。。�！ 同批轉染含eGFP的慢病毒，MOI為50熒光率達100%，而且熒光很亮。 請問這是什么問題？病毒的滴度是10^8數(shù)量級，但是為什么轉染效率這么低呢？？？ 求大神賜教�。。� |
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2樓2017-06-27 10:56:47
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