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zxlulurain新蟲 (初入文壇)
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[求助]
CHIP超聲條件請(qǐng)各位做過的大神給點(diǎn)建議 已有3人參與
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| 剛剛開始做chip，實(shí)驗(yàn)室是sonics VCX130超聲破碎儀，探頭是2mm的，要破碎的體積大約是200-400ul，細(xì)胞是sw1990和panc-1，請(qǐng)各位做過chip的蟲友們給出點(diǎn)點(diǎn)子，超聲破碎的條件多少功率，沖擊幾秒，間歇幾秒，幾個(gè)循環(huán)比較合理，可以破碎到所需要的DNA片段。 |
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xingzhikong
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10樓2015-07-15 13:00:45
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2樓2014-06-18 16:43:29
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gyesang: 應(yīng)助指數(shù)+1 2014-07-15 21:55:33
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超聲破碎的時(shí)間和功率最好自己摸索一下，超聲后跑電泳，確保片段的大小集中在500bp-1kb。 根據(jù)你超聲儀的參數(shù)，你可以試試10%功率，打5s停9s，打8-10次。（我的做法是，直接用手拿著，超聲2次放到冰上冷一會(huì)） 一定要保證不能出現(xiàn)氣泡，我的經(jīng)驗(yàn)是 超聲時(shí)探頭位于離心管的底部，但是不能接觸管壁。 |
3樓2014-06-29 16:20:28
by-今夕
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4樓2014-06-29 19:57:28
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