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sunxiao1987

新蟲(chóng) (初入文壇)

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[交流] WB顯影結(jié)果分子量漂移

我是做WB的新手，電泳條件是分離膠12%，濃縮膠5%，30mA濃縮膠90min,40mA分離膠60min,250mA轉(zhuǎn)膜120min，我的目的蛋白孵育抗體時(shí)一抗是1:100二抗1:2000，感覺(jué)時(shí)雙條帶，不知道為什么？
內(nèi)參的話一抗1:2000二抗1:2000，總是連在一起分不開(kāi)，該怎么辦？
目的蛋白正確的分子量是82KD，，但是我所做出來(lái)的條帶分子量對(duì)不上、偏小不到70KD，我的蛋白含有兩個(gè)磷酸化的位點(diǎn)，會(huì)不會(huì)是這個(gè)原因？求高手指教啊。

目的蛋白一抗1:100 二抗1:2000

內(nèi)參一抗1:2000，二抗1:2000

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1樓 2012-05-29 22:12:45

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nakice

鐵桿木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖

可能是你轉(zhuǎn)膜的時(shí)候沒(méi)有注意

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15樓2012-05-31 16:09:26

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userhung

禁蟲(chóng) (文學(xué)泰斗)

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sunxiao1987(金幣+1): 謝謝參與

應(yīng)該是這個(gè)原因~~~~~~~~~~~~~~

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2樓2012-05-29 23:00:11

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aixia5

金蟲(chóng) (小有名氣)

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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖

你做的是變性膠還是非變性膠？

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10樓2012-05-30 09:23:00

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sunxiao1987

新蟲(chóng) (初入文壇)

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引用回帖:

10樓: Originally posted by aixia5 at 2012-05-30 09:23:00
你做的是變性膠還是非變性膠？

我做的是變性凝膠

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12樓2012-05-31 08:57:30

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