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cutepigxia新蟲 (正式寫手)
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求助藍(lán)白斑篩選的相關(guān)問(wèn)題 已有1人參與
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我涂的板為什么會(huì)培養(yǎng)基都變藍(lán)色,而且也沒有多少白菌,挑一兩個(gè)看似白菌的菌落再劃線到新制的含氨變青霉素,x-gal,IPTG的平板上結(jié)果都又是藍(lán)色,想知道是什么原因,有木有人能給解釋一下,謝謝! 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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藍(lán)白斑的原理是α互補(bǔ)。JM109的LacZ基因缺少α片段,因此,不能分解x-gal顯藍(lán)色。質(zhì)粒載體上有完整的α基因序列,多克隆位點(diǎn)也在這段序列內(nèi) 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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如果在這個(gè)位點(diǎn)插入了外源片段,將會(huì)破壞α閱讀框,這種破壞大部分情況下會(huì)造成α基因失活。如果沒有插入外源基因,α片段就可以表達(dá),使得基因LacZ組裝完整,分解x-gal顯藍(lán)色 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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