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Ruby225新蟲 (小有名氣)
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穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株總是丟,怎么辦? 已有1人參與
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電轉(zhuǎn)染或PEI轉(zhuǎn)染293的細(xì)胞后,一種方式加篩選壓力(puromycin or hygromycin),篩選后少量細(xì)胞存活,擴(kuò)大培養(yǎng)后,發(fā)現(xiàn)沒有陽性,另一種方式,轉(zhuǎn)染后分單克隆,擴(kuò)大培養(yǎng)后也檢測(cè)不到陽性。原本轉(zhuǎn)染24-72小時(shí)轉(zhuǎn)染效率至少在50%,大部分可能是瞬轉(zhuǎn),但不會(huì)一個(gè)都沒有整合到基因組吧,以前我用這種方法篩選成功過幾株穩(wěn)轉(zhuǎn)株,但是最近一段時(shí)間都失敗,有遇到類似情況的嗎?想和大家交流交流 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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