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Ruby225新蟲 (小有名氣)
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穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株總是丟，怎么辦？ 已有1人參與
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電轉(zhuǎn)染或PEI轉(zhuǎn)染293的細(xì)胞后，一種方式加篩選壓力（puromycin or hygromycin），篩選后少量細(xì)胞存活，擴(kuò)大培養(yǎng)后，發(fā)現(xiàn)沒有陽(yáng)性，另一種方式，轉(zhuǎn)染后分單克隆，擴(kuò)大培養(yǎng)后也檢測(cè)不到陽(yáng)性。原本轉(zhuǎn)染24-72小時(shí)轉(zhuǎn)染效率至少在50%，大部分可能是瞬轉(zhuǎn)，但不會(huì)一個(gè)都沒有整合到基因組吧，以前我用這種方法篩選成功過(guò)幾株穩(wěn)轉(zhuǎn)株，但是最近一段時(shí)間都失敗，有遇到類似情況的嗎？想和大家交流交流 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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kangaroo0513
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2樓2017-09-07 07:54:15
Ruby225
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3樓2017-09-07 08:06:43
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4樓2017-10-19 23:12:31
5樓2018-01-19 16:54:18
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