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[求助]
GE的16/600 75pg的柱子 壓力升高 已有2人參與
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| 我有一根GE的16/600 75pg的柱子，柱體積120ml, 跑了3個樣品后，樣品buffer為（100mM Nacl, 10mM 磷酸鈉）。 之后用水沖洗，開始流速0.5ml/min，柱壓0.18Mpa。 走到350ml的時候，柱壓升高到0.28Mpa。 是怎么回事呢？換成水后，柱壓怎么在一直升高。柱子是新的，才跑了3個樣。 |
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5樓2018-02-24 17:00:05
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【答案】應助回帖
| 一定的體積流速對應一定的壓力，增大流速壓力升高，這是必然現(xiàn)象。首先你用完柱子后是需要對柱子按照清洗再生的操作方法，洗掉柱子上的非特異性吸附物質(zhì)，防止柱子填料因為殘留樣品的原因反壓增大，也便于下次使用，延長柱子壽命，再就是要清洗AKTA等純化系統(tǒng)的管路。至于用水走，壓力升高到0.28Mpa，請問對應的體積流速是多少呢？增大體積流速，壓力升高也是正常的。AKTA用純水和0.1M NaCl走柱子（測新填料強度及流速和耐壓）在增大體積流速時壓力也是會增大的最大可到0.4Mpa，對應的流速會在25ml/min左右。希望對你有所幫助。 |
4樓2018-02-24 09:21:20
dlzhkkk
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6樓2018-03-02 16:12:12
7樓2018-03-02 16:13:41
zsygxh
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在界面上有。那么就不是蛋白沉淀了，而是RNA的問題了，我以前做蛋白和RNA的相互作用，也有碰到過壓力升高問題，友情提醒一下，過RNA前務必每次都要用NaOH處理柱子，不然RNA必然會在柱上殘留(可能是非特異離子吸附)，然后污染下個樣品，別問我怎么知道的。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
8樓2018-03-02 20:06:52
9樓2018-03-04 14:15:40
zsygxh
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清洗看說明書，你都沒寫清楚用的什么柱子，分子篩一般0.5M，我一般沖1CV，換水換buffer，如果堵得嚴重可以多沖幾個CV。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
半點心10樓2018-03-04 22:01:50
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