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Xshin2829新蟲 (初入文壇)
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[求助]
往培養(yǎng)的細(xì)胞里加入GM132，想抑制蛋白降解，結(jié)果細(xì)胞為什么都死了?
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我想檢測兩個蛋白的互作，把兩種質(zhì)粒共轉(zhuǎn)進(jìn)293T細(xì)胞后，發(fā)現(xiàn)其中一種蛋白對另一種蛋白有降解作用，于是在轉(zhuǎn)染之后加入蛋白酶體抑制劑MG132，按照說明書上說的，用DMSO溶解，所用濃度為18.5μmol。我先用DMSO溶解MG132，得到濃度為185μmol的溶液，然后5μl加到有495μl培養(yǎng)液的細(xì)胞培養(yǎng)孔中，這樣MG132的終濃度就是1.85μmol了，因為試劑不夠用，我都這樣縮小10倍使用了，可是三小時后細(xì)胞全都死亡破碎了，我覺得可能是DMSO對細(xì)胞有毒害作用或是MG132的濃度太高了，又縮小了2倍使用，細(xì)胞還是死了，請問我是不是哪里做錯了，想不通啊，求助! 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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s272605623
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2樓2018-12-05 20:55:58
Xshin2829
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3樓2019-01-17 21:31:13
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