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yipinyoulan銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
對(duì)乳酸菌電轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)質(zhì)粒，轉(zhuǎn)了一個(gè)月老是轉(zhuǎn)不進(jìn)去，求大神們指導(dǎo)！
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問題：構(gòu)建了兩個(gè)質(zhì)粒，第一個(gè)質(zhì)粒一次電轉(zhuǎn)化就轉(zhuǎn)進(jìn)去了，另一個(gè)質(zhì)粒怎么轉(zhuǎn)都轉(zhuǎn)不進(jìn)去 電轉(zhuǎn)條件：1、乳酸乳球菌為L(zhǎng).lac.NZ9000,一般是在含2.5%甘氨酸的GM17培養(yǎng)基中養(yǎng)8~9個(gè)小 時(shí)，待其OD600達(dá)到0.2以上時(shí)，做成感受態(tài)。 2、 感受態(tài)一般為100ul或40ul，質(zhì)粒一般為1ul或者2ul（濃度為~1ug/ul） 3、電壓：2.4KV或者2.5KV 脈沖間隔：~5.8ms 4、電轉(zhuǎn)化后的恢復(fù)培養(yǎng)基：GM17加適當(dāng)濃度的蔗糖，MgCl2，Cacl2。 現(xiàn)象：將電轉(zhuǎn)后的恢復(fù)培養(yǎng)的菌涂到含氯霉素的GM17的抗性平板，30度靜置培養(yǎng)1~2天，甚至3天，什么都不長(zhǎng)。 急求解釋！萬分感謝！ |
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werty1245
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2樓2013-11-14 11:03:28
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3樓2013-11-14 11:04:46
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5樓2017-09-18 14:11:16
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6樓2017-11-07 20:06:41
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7樓2018-04-10 10:45:34
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我也想問，樓主，最后咋轉(zhuǎn)進(jìn)去的，轉(zhuǎn)不進(jìn)去會(huì)和感受態(tài)有關(guān)么 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
9樓2018-04-16 12:13:37
10樓2018-06-14 12:36:25
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