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蜂鳥(niǎo)404

鐵桿木蟲(chóng) (正式寫手)

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我做的是細(xì)菌中蛋白質(zhì)與DNA的相互作用，我想用染色質(zhì)免疫共沉淀的方法通過(guò)蛋白質(zhì)來(lái)找其相互作用的DNA，然后分析，現(xiàn)在我有一個(gè)flag的抗體，我不知道要把這個(gè)標(biāo)簽加到蛋白的基因5‘端還是3’端，還有我想通過(guò)同源重組的方式來(lái)把這小段序列加上去，這個(gè)引物要怎么設(shè)計(jì)呢,

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1樓 2014-10-31 11:43:10

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ncuduhan

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我去如果只要加上24bp的話直接在引物上加上啊，我加過(guò)60多bp的都可以加上，妥妥的，沒(méi)必要同源什么的

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2樓2014-10-31 21:10:32

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lxj341401

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gyesang: 金幣+1, 鼓勵(lì)交流！ 2014-11-02 22:25:59

直接設(shè)計(jì)引物，通過(guò)PCR加上去，加24bp根本不是問(wèn)題。

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3樓2014-10-31 22:49:08

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dongdekun

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設(shè)計(jì)引物時(shí)直接把相關(guān)序列加在引物上（注意序列方向不要搞錯(cuò)），即可輕松搞定。。。

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4樓2014-11-02 12:42:56

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sylar1022

木蟲(chóng) (正式寫手)

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加在引物上pcr就行了。。。

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5樓2014-11-02 14:08:59

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啊咩咩咩咩~

新蟲(chóng) (小有名氣)

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引用回帖:

2樓: Originally posted by ncuduhan at 2014-10-31 21:10:32
我去如果只要加上24bp的話直接在引物上加上啊，我加過(guò)60多bp的都可以加上，妥妥的，沒(méi)必要同源什么的

但是這樣引物長(zhǎng)度不會(huì)太長(zhǎng)了嗎？引物過(guò)長(zhǎng)不是會(huì)導(dǎo)致退火溫度過(guò)高這樣也會(huì)p不出來(lái)啊？

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6樓2020-05-20 21:21:46

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等你的時(shí)候

禁蟲(chóng)

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7樓2020-05-21 23:23:57

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