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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » PCR相關 » 求助藍白斑篩選的相關問題
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cutepigxia新蟲 (正式寫手)
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求助藍白斑篩選的相關問題 已有1人參與
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我涂的板為什么會培養(yǎng)基都變藍色，而且也沒有多少白菌，挑一兩個看似白菌的菌落再劃線到新制的含氨變青霉素，x-gal，IPTG的平板上結果都又是藍色，想知道是什么原因，有木有人能給解釋一下，謝謝！ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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22樓2017-04-20 10:29:42
小松鼠45
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2樓2017-04-18 10:56:52
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藍白斑的原理是α互補。JM109的LacZ基因缺少α片段，因此，不能分解x-gal顯藍色。質粒載體上有完整的α基因序列，多克隆位點也在這段序列內 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2017-04-18 11:45:33
小松鼠45
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如果在這個位點插入了外源片段，將會破壞α閱讀框，這種破壞大部分情況下會造成α基因失活。如果沒有插入外源基因，α片段就可以表達，使得基因LacZ組裝完整，分解x-gal顯藍色 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2017-04-18 11:49:09
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