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nbadlq鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
質(zhì)粒連接轉(zhuǎn)化后變小 已有1人參與
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質(zhì)粒用的PIB139，大約6KB，目的基因1.5KB，酶切純化跑膠驗(yàn)證是對(duì)的。然后做鏈接20ul體系，2ul質(zhì)粒8ul目的基因。取9ul連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化后，在板上長(zhǎng)得感覺(jué)不錯(cuò)。試劑盒提取質(zhì)粒跑膠驗(yàn)證出現(xiàn)了怪現(xiàn)象。重組質(zhì)粒變小了，質(zhì)粒酶切貌似也切不開(kāi)。 酶切純化質(zhì)粒和目的基因.jpg P51025-094112.jpg 原質(zhì)粒、連接質(zhì)粒、連接質(zhì)粒后面是雙酶切 |
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塵夢(mèng)心殤
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樓主有知道原因嗎?我現(xiàn)在也是這樣，質(zhì)粒連接好之后，變小了，但目標(biāo)片段都能p出來(lái)。 考慮是質(zhì)粒酶切連接后，超螺旋狀態(tài)，但不知道是不是。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2022-01-13 18:01:36
nbadlq
鐵蟲 (初入文壇)
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2樓2015-10-26 17:19:33
局也土豆
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4樓2022-01-18 21:29:47
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5樓2022-06-24 14:36:49
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