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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » DNA重組 » 質粒連接轉化后變小
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nbadlq鐵蟲 (初入文壇)
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質粒連接轉化后變小 已有1人參與
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質粒用的PIB139，大約6KB，目的基因1.5KB，酶切純化跑膠驗證是對的。然后做鏈接20ul體系，2ul質粒8ul目的基因。取9ul連接產物轉化后，在板上長得感覺不錯。試劑盒提取質粒跑膠驗證出現了怪現象。重組質粒變小了，質粒酶切貌似也切不開。 酶切純化質粒和目的基因.jpg P51025-094112.jpg 原質粒、連接質粒、連接質粒后面是雙酶切 |
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nbadlq
鐵蟲 (初入文壇)
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2樓2015-10-26 17:19:33
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樓主有知道原因嗎?我現在也是這樣，質粒連接好之后，變小了，但目標片段都能p出來。 考慮是質粒酶切連接后，超螺旋狀態(tài)，但不知道是不是。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2022-01-13 18:01:36
局也土豆
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4樓2022-01-18 21:29:47
5樓2022-06-24 14:36:49
烏克蘭跑男
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6樓2022-08-09 22:22:57
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