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philoqi新蟲 (小有名氣)
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PCR擴(kuò)增做的好好的，突然擴(kuò)增不出來了，什么原因？
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PCR擴(kuò)增做的好好的，一直很穩(wěn)定，突然擴(kuò)增不出來了，見圖片1。后來換了機(jī)器，也是擴(kuò)增不出來。前幾天擴(kuò)增出的也擴(kuò)不出來了。重新溶解干粉引物也不行，引物有半年了，-20度保存。又把兩個樣本同時用兩種引物做PCR，這種還是擴(kuò)增不出，另一種引物可以擴(kuò)增見圖2。這兩天擴(kuò)增條帶很暗，見圖3，條件沒有變，不知道什么原因？DNA應(yīng)該沒問題，是什么原因呢？ QQ圖片1.jpg 圖片2.png 圖片3.png |
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philoqi: 金幣+50, 博學(xué)EPI+1, ★★★很有幫助 2016-02-19 15:33:31
philoqi: 金幣+50, 博學(xué)EPI+1, ★★★很有幫助 2016-02-19 15:33:31
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這種情況下就需要做個陽性控制看看。 原因幾種可能，逐個排除： 1、酶，酶保存溫度是不是低溫-20？這個跟酶的質(zhì)量有關(guān)。 2、引物，如果重新溶都沒問題就可以排除了 3、試劑buffer。有些試劑會析出，你查看下是不是濃度已經(jīng)變化了，如果排除上面的問題就重新配制試試。 |
3樓2016-02-07 12:16:23
匿名
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2樓2016-01-31 18:57:14
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4樓2016-02-07 18:52:30
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