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草哥cium新蟲 (正式寫手)
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[求助]
菌搖久了會影響表達嗎。 已有1人參與
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bl21.單菌落.準備搖起來做甘油菌，以后拿出來一點擴大培養(yǎng)做表達的。。。今天早上開始搖10:30。。晚上忘記取出來了，估計得明天8:30才能取出來，這樣子搖久了會不會影響，會不會死完，，或者影響以后1:100擴大培養(yǎng)表達 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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wuhu0612331
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最好是菌處于對數(shù)增長期，剛剛達到平穩(wěn)期保菌比較好，我們的操作基本上單菌落搖不超過12小時，另外BL21里面如果載體是Amp抗性，搖久了很容易質(zhì)粒丟失，因為搖久了菌分泌的酶完全可以降解青霉素使得抗生素根本沒有選擇壓力。所以質(zhì)粒丟失的菌體仍然會瘋長。不要嫌麻煩，將菌按1:1000重新接菌搖一下比較保險。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2018-06-25 18:31:17
司馬錯
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會影響菌種活力，不如你早晨轉(zhuǎn)接一下，重新培養(yǎng)晚上部分保種，部分再轉(zhuǎn)，次日擴大培養(yǎng)，如果有能加抗生素那是一定要加的。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2018-06-25 00:49:42
hc-material
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3樓2018-06-25 13:30:49
草哥cium
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5樓2018-06-25 23:53:08
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