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草哥cium新蟲 (正式寫手)
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[求助]
菌搖久了會(huì)影響表達(dá)嗎。 已有1人參與
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bl21.單菌落.準(zhǔn)備搖起來做甘油菌，以后拿出來一點(diǎn)擴(kuò)大培養(yǎng)做表達(dá)的。。。今天早上開始搖10:30。。晚上忘記取出來了，估計(jì)得明天8:30才能取出來，這樣子搖久了會(huì)不會(huì)影響，會(huì)不會(huì)死完，，或者影響以后1:100擴(kuò)大培養(yǎng)表達(dá) 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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會(huì)影響菌種活力，不如你早晨轉(zhuǎn)接一下，重新培養(yǎng)晚上部分保種，部分再轉(zhuǎn)，次日擴(kuò)大培養(yǎng)，如果有能加抗生素那是一定要加的。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2018-06-25 00:49:42
hc-material
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3樓2018-06-25 13:30:49
wuhu0612331
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最好是菌處于對(duì)數(shù)增長(zhǎng)期，剛剛達(dá)到平穩(wěn)期保菌比較好，我們的操作基本上單菌落搖不超過12小時(shí)，另外BL21里面如果載體是Amp抗性，搖久了很容易質(zhì)粒丟失，因?yàn)閾u久了菌分泌的酶完全可以降解青霉素使得抗生素根本沒有選擇壓力。所以質(zhì)粒丟失的菌體仍然會(huì)瘋長(zhǎng)。不要嫌麻煩，將菌按1:1000重新接菌搖一下比較保險(xiǎn)。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2018-06-25 18:31:17
草哥cium
新蟲 (正式寫手)
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5樓2018-06-25 23:53:08
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