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樹下的apple新蟲 (初入文壇)
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[交流]
基因工程,構(gòu)建表達質(zhì)粒 已有3人參與
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| 請問大佬們,構(gòu)建表達質(zhì)粒時,為驗證目的片段與載體是否連接上,用NEB的T4連接酶連接后做了轉(zhuǎn)化、菌液PCR可以擴出目的大小條帶,提質(zhì)粒后仍用NEB的酶做雙酶切(50μl體系),質(zhì)粒1μg定量,兩種酶各用1μl, 37攝氏度切了7h也最終也沒切開會是什么原因呢?用該質(zhì)粒去擴目的片段也可以擴出來。酶加少了嗎? |
新蟲 (初入文壇)
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