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樹(shù)下的apple新蟲(chóng) (初入文壇)
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基因工程,構(gòu)建表達(dá)質(zhì)粒 已有3人參與
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| 請(qǐng)問(wèn)大佬們,構(gòu)建表達(dá)質(zhì)粒時(shí),為驗(yàn)證目的片段與載體是否連接上,用NEB的T4連接酶連接后做了轉(zhuǎn)化、菌液PCR可以擴(kuò)出目的大小條帶,提質(zhì)粒后仍用NEB的酶做雙酶切(50μl體系),質(zhì)粒1μg定量,兩種酶各用1μl, 37攝氏度切了7h也最終也沒(méi)切開(kāi)會(huì)是什么原因呢?用該質(zhì)粒去擴(kuò)目的片段也可以擴(kuò)出來(lái)。酶加少了嗎? |
鐵蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
新蟲(chóng) (初入文壇)

新蟲(chóng) (初入文壇)
鐵蟲(chóng) (初入文壇)

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