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藥娘子新蟲 (小有名氣)
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轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞，平板篩選不長(zhǎng)菌？ 已有5人參與
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將提取的質(zhì)粒（卡那抗性）轉(zhuǎn)到BL21，陰性對(duì)照和實(shí)驗(yàn)組都沒長(zhǎng)菌，其中用到的BL21是課題組其他同學(xué)曾成功轉(zhuǎn)化的，質(zhì)粒的濃度是13.7ng/微升，10微升質(zhì)粒對(duì)50微升BL21，接下來(lái)我要怎樣修改實(shí)驗(yàn)方案才能轉(zhuǎn)化成功？求給建議 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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原來(lái)，是這樣
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西門吹雪170: 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2018-01-09 21:42:45
西門吹雪170: 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2018-01-09 21:42:45
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你的感受態(tài)為什么要吸取50ul，一般不都是50ul或者100ul分裝一個(gè)ep管的么。步驟沒有什么大問(wèn)題，我一般熱激90s。從你的步驟看來(lái)很大概率是感受態(tài)不行了。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
6樓2017-09-22 09:51:19
2樓2017-09-22 09:10:48
藥娘子
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感受態(tài)細(xì)胞保存于-80℃，一般來(lái)說(shuō)，50微升感受態(tài)細(xì)胞不是對(duì)應(yīng)50-100ng的質(zhì)粒嗎？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2017-09-22 09:13:06
原來(lái)，是這樣
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西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2018-01-09 21:43:49
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drwhoknowss: 金幣+1, 可行 2018-02-08 04:02:28
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你拿個(gè)陽(yáng)性質(zhì)粒再轉(zhuǎn)化試試，看看轉(zhuǎn)化效率怎么樣，感受態(tài)到底失活沒有。如果沒有那就是你轉(zhuǎn)化步驟哪一步出問(wèn)題了，可以把你的轉(zhuǎn)化步驟發(fā)一下，給你參考參考。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2017-09-22 09:15:22
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