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藥娘子新蟲 (小有名氣)
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[求助]
轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞，平板篩選不長菌？ 已有5人參與
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將提取的質(zhì)粒（卡那抗性）轉(zhuǎn)到BL21，陰性對照和實驗組都沒長菌，其中用到的BL21是課題組其他同學(xué)曾成功轉(zhuǎn)化的，質(zhì)粒的濃度是13.7ng/微升，10微升質(zhì)粒對50微升BL21，接下來我要怎樣修改實驗方案才能轉(zhuǎn)化成功？求給建議 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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藥娘子
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對��！100微升一管，取出50微升。我也懷疑是感受態(tài)細(xì)胞的問題，所以換了一個曾成功轉(zhuǎn)化的感受態(tài)，但也沒有長，是不是我自已的問題啊 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
7樓2017-09-22 10:10:48
2樓2017-09-22 09:10:48
藥娘子
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感受態(tài)細(xì)胞保存于-80℃，一般來說，50微升感受態(tài)細(xì)胞不是對應(yīng)50-100ng的質(zhì)粒嗎？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2017-09-22 09:13:06
原來，是這樣
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你拿個陽性質(zhì)粒再轉(zhuǎn)化試試，看看轉(zhuǎn)化效率怎么樣，感受態(tài)到底失活沒有。如果沒有那就是你轉(zhuǎn)化步驟哪一步出問題了，可以把你的轉(zhuǎn)化步驟發(fā)一下，給你參考參考。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2017-09-22 09:15:22
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