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xqiongwei鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
大引物PCR建立隨機突變庫 已有3人參與
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小妹最近在建立隨機突變庫,先是易錯PCR,得到300bp左右的隨機突變混合物,切膠純化后將此混合物作為大引物,運用MEGAWHOP的方法進行全質(zhì)粒PCR。然而問題來了,點樣孔處很亮,其他地方看不到特異性的條帶,然而,用未突變的片段作為引物是可以做出來的,已上圖。我試過56度、68度、72度退火溫度,都不行,快崩潰了,求大師指導一二。感激不盡。 圖片1.png |


鐵蟲 (小有名氣)


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