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[求助]
gateway中'LR反應(yīng) 已有2人參與
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做該反應(yīng)時對感受態(tài)有什么要求嗎望告知，我有DH5&感受態(tài)和TransDB3.1的感受態(tài)，分不清用哪個了 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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傷何處
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 39 (小學(xué)生)
- 金幣: 2444.9
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- 專業(yè): 果樹學(xué)
8樓2017-08-04 00:42:35
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西門吹雪170: 金幣+5, 鼓勵回帖交流 2017-08-04 07:42:40
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西門吹雪170: 金幣+5, 鼓勵回帖交流 2017-08-04 07:42:40
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Gateway技術(shù)是克隆和亞克隆DNA序列的一項新穎的通用系統(tǒng)，便于功能基因的分析和蛋白質(zhì)的表達。一旦進入這個多功能的操作系統(tǒng)，DNA片段可以通過位點特異的重組在載體之間轉(zhuǎn)移。 Gateway技術(shù)是基于已研究的非常清楚的λ噬菌體位點特異重組系統(tǒng)（attB x attP →attL x attR）。BP和LR兩個反應(yīng)就構(gòu)成搜索了Gateway技術(shù). BP反應(yīng)是利用一個attB DNA片段或表達克隆和一個attP供體載體之間的重組反應(yīng)，創(chuàng)建一個入門克隆。LR反應(yīng)是一個attL入門克隆和一個attR目的載體之間的重組反應(yīng)。LR反應(yīng)用來在平行的反應(yīng)中轉(zhuǎn)移目的序列到一個或更多個目的載體。 在BP反應(yīng)中基因轉(zhuǎn)移形成入門克隆，在LR反應(yīng)中入門克隆可以作為反應(yīng)物產(chǎn)生最終的表達克隆。 完成構(gòu)建Gateway表達克隆僅需兩步： （1）創(chuàng)建入門克隆，通過PCR或傳統(tǒng)的克隆方法將目的基因克隆進入門載體。 （2）混合包含目的基因的入門克隆和合適的目的載體以及Gateway LR Clonase酶，構(gòu)建表達克隆。（表達克隆用來在合適的宿主中進行蛋白的表達和分析。） |
2樓2017-08-01 16:07:36
3樓2017-08-01 16:13:29
4樓2017-08-01 16:32:32
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