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fast-rui新蟲 (小有名氣)
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[交流]
異源表達(dá)蛋白遇到問(wèn)題 已有8人參與
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本人最近在做異源表達(dá)，用的pet28a表達(dá)載體，宿主菌是BL21，od搖到0.6-0.8，16℃誘導(dǎo)19h，做了幾次蛋白大部分都在包涵體中，iptg濃度試過(guò)0.1-0.8mM的。這次打算試試培養(yǎng)基多調(diào)幾個(gè)ph試試。 但是想問(wèn)就是我的蛋白等電點(diǎn)是6.74，LB的ph會(huì)影響表達(dá)嗎？破碎的時(shí)候蛋白裂解液的ph設(shè)為多少比較合適？有沒有大神可以給我點(diǎn)建議，看看能不能把包涵體減少。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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張凡云
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
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兩個(gè)方案，用pGEX4T-1這樣的融合表達(dá)系統(tǒng)，二是用rosetta這樣的宿主菌 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
8樓2019-06-12 09:20:44
2樓2019-06-11 21:03:08
小太陽(yáng)2017
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3樓2019-06-11 22:22:47
fast-rui
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4樓2019-06-11 22:44:34
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