 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2827 | 回復(fù): 21 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
[交流]
求助SDS-PAGE電泳中的相關(guān)問題
|
|||
|
我最近在做IPTG誘導(dǎo)，想通過SDS-PAGE電泳檢測一下是否成功誘導(dǎo)出蛋白。但是在電泳過程中遇到一些問題，還請各位指教，謝謝。 我的目的蛋白大小在50kDa到70kDa之間，配膠是買的索萊寶公司的凝膠試劑盒，根據(jù)試劑盒中的說明書，選用的是5%的濃縮膠和10%的分離膠。電泳過程中遇到的問題如下： 1 上層濃縮膠灌入玻璃板并插入梳子之后，在濃縮膠層會出現(xiàn)與梳齒寬度相似的一條條不均勻豎條紋，請問是什么原因呢？ 2 電泳接通電源之后，我先是用140V跑濃縮膠，然后用200V跑分離膠。但是跑出來的條帶是斜著下來的（下面有照片）。 3 不光帶是斜著跑下來的，15個膠孔每個孔都不是水平跑下來的，有的快，有的慢，這個正常嗎？我一共是5個樣本，其他的膠孔上的是與樣本等體積的1×protein buffer 。很明顯，5個樣本跑的速度比其他上了1×protein buffer 跑出來的速度要快。 4 所有的條帶都不是水平線，每一個膠孔上的樣品都很亂，似乎不是很均勻，這個也是不正常的吧？ 5 這個SDS-PAGE電泳我在北大實(shí)驗(yàn)室做的時候都沒有出現(xiàn)以上這些問題。在北大實(shí)驗(yàn)室用的制膠試劑、電泳槽、電泳儀都與我們實(shí)驗(yàn)室的不同。（另外，北大實(shí)驗(yàn)室做的SDS-PAGE電泳自始至終電壓都是200V，用200V的電壓跑1h即可。我也試了一下，可是跑出來的帶還是那個樣子）如下圖最后一張圖片，是在北大實(shí)驗(yàn)室做的PAGE電泳圖條帶整齊劃一，前面4張是我在本實(shí)驗(yàn)室做的電泳圖片，條帶層次不齊 還請各位前輩能給我一些建議，希望各位多多指教，謝謝大家 發(fā)自小木蟲Android客戶端 [ Last edited by 零星公寓 on 2017-9-18 at 21:00 ] |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有210人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
邵陽學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
9樓2017-09-19 01:32:04
2樓2017-09-18 20:57:52
3樓2017-09-18 20:58:00
4樓2017-09-18 20:58:21
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 0703 化學(xué) 求調(diào)劑，一志愿山東大學(xué) 342 分 +3 | Shern—- 2026-03-28 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 283求調(diào)劑 +3 | A child 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 320分，材料與化工專業(yè)，求調(diào)劑 +9 | 一定上岸aaa 2026-03-27 | 13/650 |
|
|
|
[考研]
 一志愿武漢理工，總分321，英一數(shù)二，求老師收留。
+6
|
nnnnnnn5 2026-03-25 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0856，材料與化工321分求調(diào)劑 +12 | 大饞小子 2026-03-27 | 13/650 |
|
|
|
[考研]
材料與化工考研調(diào)劑
+17
|
孅華 2026-03-22 | 17/850 |
|
|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +11 | 陽陽哇塞 2026-03-27 | 12/600 |
|
|
|
[考博] 26申博 +3 | 加油沖啊！ 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑，一志愿 南京航空航天大學(xué)大學(xué) ，080500材料科學(xué)與工程學(xué)碩 +4 | @taotao 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +6 | wasdssaa 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑 +4 | 柚柚yoyo 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0854電子信息求調(diào)劑 +7 | α____ 2026-03-22 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 282求調(diào)劑 +3 | wcq131415 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 086003食品工程求調(diào)劑 +6 | 淼淼111 2026-03-24 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)學(xué)碩求調(diào)劑 +7 | 小羊睡著了? 2026-03-23 | 10/500 |
|
|
|
[基金申請] 請教下大家 2026年國家基金申請是雙盲審嗎？ +3 | lishucheng1 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 335求調(diào)劑 +4 | yuyu宇 2026-03-23 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 341求調(diào)劑(一志愿湖南大學(xué)070300) +5 | 番茄頭--- 2026-03-22 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿重慶大學(xué)085700資源與環(huán)境，總分308求調(diào)劑 +7 | 墨墨漠 2026-03-23 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 285求調(diào)劑 +6 | ytter 2026-03-22 | 6/300 |
|