 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 2832 | 回復: 21 | |||
[交流]
求助SDS-PAGE電泳中的相關(guān)問題
|
|||
|
我最近在做IPTG誘導，想通過SDS-PAGE電泳檢測一下是否成功誘導出蛋白。但是在電泳過程中遇到一些問題，還請各位指教，謝謝。 我的目的蛋白大小在50kDa到70kDa之間，配膠是買的索萊寶公司的凝膠試劑盒，根據(jù)試劑盒中的說明書，選用的是5%的濃縮膠和10%的分離膠。電泳過程中遇到的問題如下： 1 上層濃縮膠灌入玻璃板并插入梳子之后，在濃縮膠層會出現(xiàn)與梳齒寬度相似的一條條不均勻豎條紋，請問是什么原因呢？ 2 電泳接通電源之后，我先是用140V跑濃縮膠，然后用200V跑分離膠。但是跑出來的條帶是斜著下來的（下面有照片）。 3 不光帶是斜著跑下來的，15個膠孔每個孔都不是水平跑下來的，有的快，有的慢，這個正常嗎？我一共是5個樣本，其他的膠孔上的是與樣本等體積的1×protein buffer 。很明顯，5個樣本跑的速度比其他上了1×protein buffer 跑出來的速度要快。 4 所有的條帶都不是水平線，每一個膠孔上的樣品都很亂，似乎不是很均勻，這個也是不正常的吧？ 5 這個SDS-PAGE電泳我在北大實驗室做的時候都沒有出現(xiàn)以上這些問題。在北大實驗室用的制膠試劑、電泳槽、電泳儀都與我們實驗室的不同。（另外，北大實驗室做的SDS-PAGE電泳自始至終電壓都是200V，用200V的電壓跑1h即可。我也試了一下，可是跑出來的帶還是那個樣子）如下圖最后一張圖片，是在北大實驗室做的PAGE電泳圖條帶整齊劃一，前面4張是我在本實驗室做的電泳圖片，條帶層次不齊 還請各位前輩能給我一些建議，希望各位多多指教，謝謝大家 發(fā)自小木蟲Android客戶端 [ Last edited by 零星公寓 on 2017-9-18 at 21:00 ] |
回復此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設(shè)計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有195人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復
-
留學--博士招生
已經(jīng)有16人回復
-
化學工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復
-
邵陽學院食品與化學工程學院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
9樓2017-09-19 01:32:04
14樓2017-09-19 10:50:42
2樓2017-09-18 20:57:52
3樓2017-09-18 20:58:00
4樓2017-09-18 20:58:21
5樓2017-09-18 20:58:24
6樓2017-09-18 20:59:03
清平道人
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 238.1
- 帖子: 24
- 在線: 5.5小時
- 蟲號: 3850365
- 注冊: 2015-05-05
- 性別: GG
- 專業(yè): 植物病理學
7樓2017-09-18 21:34:59
8樓2017-09-18 22:01:22
10樓2017-09-19 07:10:51
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 零星公寓 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 275求調(diào)劑 +14 | Micky11223 2026-03-25 | 19/950 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 調(diào)劑310 +12 | 溫柔的晚安 2026-03-25 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +5 | BrightLL 2026-03-29 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 334分 一志愿武理 材料求調(diào)劑 +7 | 李李不服輸 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 279求調(diào)劑 +4 | 蝶舞輕繞 2026-03-29 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085600，專業(yè)課化工原理，321分求調(diào)劑 +5 | 大饞小子 2026-03-28 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 學碩274求調(diào)劑 +9 | Li李魚 2026-03-26 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 食品工程專碩一志愿中海洋309求調(diào)劑 +4 | 小張zxy張 2026-03-26 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 求化學調(diào)劑 +4 | wulanna 2026-03-28 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑推薦 材料 304 +15 | 荷包蛋hyj 2026-03-26 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +4 | Sanmu-124 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 305求調(diào)劑 +5 | 哇盧卡庫 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +10 | 呼呼？~+123456 2026-03-24 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑 +3 | 李嘉圖·S·路 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 292求調(diào)劑 +4 | 求求了收下我吧?/a> 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑求收留 +7 | 果然有我 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研]
材料調(diào)劑
 5+4
|
想要一壺桃花水 2026-03-25 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 281求調(diào)劑 +3 | 亞克西good 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿北化315 求調(diào)劑 +3 | akrrain 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +6 | 研研，接電話 2026-03-24 | 7/350 |
|