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緊急求助!脂質(zhì)體包封率不穩(wěn)定 已有1人參與
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已經(jīng)研二下學(xué)期了,課題才剛開(kāi)始。。。關(guān)于脂質(zhì)體的制備及評(píng)價(jià)。 我做的藥物是水溶性的,用逆向蒸發(fā)法做的。 具體過(guò)程如下:將蛋黃卵磷脂和膽固醇4:1比例溶于乙醚,加入原料藥的磷酸鹽緩沖液,超聲形成乳劑,轉(zhuǎn)移入茄形瓶中,降壓蒸發(fā)至形成膠態(tài),加入磷酸鹽緩沖液,旋轉(zhuǎn)使瓶壁上的凝膠脫落,減壓下繼續(xù)蒸發(fā),即得脂質(zhì)體混懸液。 乙醚用量為30ml,pbs10ml,最后水化的pbs為20ml,茄形瓶為500ml的。 之前我的脂類(lèi)濃度為25mg/ml(磷脂600g,膽固醇150g),旋蒸時(shí)真空高一些,蒸的比較快,會(huì)起泡,最后瓶底是那種蜂窩狀的膠狀物質(zhì),洗膜時(shí)很容易就洗下來(lái)了,得到乳白色的混懸液。此時(shí)包封率最高能達(dá)到60%多。我看了一些資料說(shuō)旋蒸的時(shí)候不能起泡,速度要慢一些,形成均一的薄膜,且最后脂質(zhì)體混懸液要是泛藍(lán)色乳光的透明裝液體。于是我將脂類(lèi)濃度變小,嘗試了15mg/ml,10mg/ml,5mg/ml的,且真空度控制在0.03mMpa左右,旋蒸的很慢,這樣倒是基本能形成均勻薄膜,只最后在瓶底有較厚的膠狀物質(zhì),但是我加pbs洗膜的時(shí)候很困難,怎么搖晃振蕩都洗不下來(lái),且底部的膠狀物質(zhì)散開(kāi),形成一團(tuán)一團(tuán)的小塊散在pbs液中,就是不溶,于是我又減壓蒸發(fā)繼續(xù)旋轉(zhuǎn),膠狀小塊開(kāi)始膨大,起沫,然后才溶解。但是。。!這樣制備的脂質(zhì)體包封率只有20%左右。 蒼天啊,到底是怎么一回事,大家快幫我看看,到底哪里出了問(wèn)題 |
脂質(zhì)體 |
金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
銀蟲(chóng) (小有名氣)
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我現(xiàn)在不為這個(gè)糾結(jié)了,查了藥劑書(shū),上面并沒(méi)有明確要求旋蒸有機(jī)試劑的時(shí)候必須成膜,這個(gè)又不是薄膜法,只是說(shuō)形成膠狀物質(zhì),所以,真空度完全可以加大,讓它起泡沸騰,這樣蒸的也快,最后洗膜的時(shí)候也容易,而且洗膜很完全,基本手搖幾分鐘就可以形成均一的乳液了,這個(gè)時(shí)候再繼續(xù)旋蒸除去殘留有機(jī)試劑,之后關(guān)掉真空,水化一定時(shí)間就好了。我這樣做之后,包封率比較穩(wěn)定了,不會(huì)忽高忽低,而且用顯微鏡觀察了,脂質(zhì)體形態(tài)也挺圓的。 希望能幫到你,大家共同學(xué)習(xí) |
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