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[求助]
緊急求助！脂質(zhì)體包封率不穩(wěn)定 已有1人參與
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已經(jīng)研二下學(xué)期了，課題才剛開(kāi)始。。。關(guān)于脂質(zhì)體的制備及評(píng)價(jià)。 我做的藥物是水溶性的，用逆向蒸發(fā)法做的。 具體過(guò)程如下：將蛋黃卵磷脂和膽固醇4:1比例溶于乙醚，加入原料藥的磷酸鹽緩沖液，超聲形成乳劑，轉(zhuǎn)移入茄形瓶中，降壓蒸發(fā)至形成膠態(tài)，加入磷酸鹽緩沖液，旋轉(zhuǎn)使瓶壁上的凝膠脫落，減壓下繼續(xù)蒸發(fā)，即得脂質(zhì)體混懸液。 乙醚用量為30ml，pbs10ml，最后水化的pbs為20ml，茄形瓶為500ml的。 之前我的脂類濃度為25mg/ml（磷脂600g，膽固醇150g），旋蒸時(shí)真空高一些，蒸的比較快，會(huì)起泡，最后瓶底是那種蜂窩狀的膠狀物質(zhì)，洗膜時(shí)很容易就洗下來(lái)了，得到乳白色的混懸液。此時(shí)包封率最高能達(dá)到60%多。我看了一些資料說(shuō)旋蒸的時(shí)候不能起泡，速度要慢一些，形成均一的薄膜，且最后脂質(zhì)體混懸液要是泛藍(lán)色乳光的透明裝液體。于是我將脂類濃度變小，嘗試了15mg/ml，10mg/ml，5mg/ml的，且真空度控制在0.03mMpa左右，旋蒸的很慢，這樣倒是基本能形成均勻薄膜，只最后在瓶底有較厚的膠狀物質(zhì)，但是我加pbs洗膜的時(shí)候很困難，怎么搖晃振蕩都洗不下來(lái)，且底部的膠狀物質(zhì)散開(kāi)，形成一團(tuán)一團(tuán)的小塊散在pbs液中，就是不溶，于是我又減壓蒸發(fā)繼續(xù)旋轉(zhuǎn)，膠狀小塊開(kāi)始膨大，起沫，然后才溶解。但是�。。�！這樣制備的脂質(zhì)體包封率只有20%左右。 蒼天啊，到底是怎么一回事，大家快幫我看看，到底哪里出了問(wèn)題 |
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 脂質(zhì)體 |
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3樓2013-04-20 08:19:16
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我現(xiàn)在不為這個(gè)糾結(jié)了，查了藥劑書(shū)，上面并沒(méi)有明確要求旋蒸有機(jī)試劑的時(shí)候必須成膜，這個(gè)又不是薄膜法，只是說(shuō)形成膠狀物質(zhì)，所以，真空度完全可以加大，讓它起泡沸騰，這樣蒸的也快，最后洗膜的時(shí)候也容易，而且洗膜很完全，基本手搖幾分鐘就可以形成均一的乳液了，這個(gè)時(shí)候再繼續(xù)旋蒸除去殘留有機(jī)試劑，之后關(guān)掉真空，水化一定時(shí)間就好了。我這樣做之后，包封率比較穩(wěn)定了，不會(huì)忽高忽低，而且用顯微鏡觀察了，脂質(zhì)體形態(tài)也挺圓的。 希望能幫到你，大家共同學(xué)習(xí) |
4樓2013-04-20 19:58:45
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