 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 2/1 | 返回列表 |
| 查看: 5871 | 回復: 100 | |||
| 當前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
[交流]
求助大神，分子基礎薄弱 引物設計擴不出來!
|
|||
|
我的目的基因序列TTGGACAACGCCTTCCCCTTCGGGACATGCATCAACACGTCCGTCATCCAGAAGCCGGCCTTCCTCGACTTCTTCACCAACCACTTCGACTGGGCCGTCTTCGAGAACGAGCTCAAGTGGTACCACACGGAGGTGCAGCAGGGCCAGCTCAACTACGCCGACGCCGACGCGCTGCTCGCGTTCTGCGACCGCCTGGGCAAGACCGTCCGCGGCCACTGCGTCTTCTGGTCCGTGGACGGCGACGTGCAGCAGTGGGTCAAGAACCTCAACAAGGACCAGCTCAGGTCCGCCATGCAGAGCCGCCTCGAGGGCCTCGTCTCCCGCTACGCCGGCAGGTTCAAGCACTACGACGTCAACAACGAGATGCTGCACGGCCGCTTCTTCCGGGACCGCCTCGGCGACGAGGACGTCCCGGCGTACATGTTCAAGGAGGTGGCGCGGCTGGACCCGGAGCCCGTGCTCTTCGTCAACGACTACAACGTGGAGTGCGGCAACGACCCCAACGCGACGCCGGAGAAGTACGCCGAGCAGGTCGCATGGCTGCAGAGCTGCGGCGCGGTGGTGCGCGGCATCGGGCTGCAGGGCCACGTGCAAAACCCGGTCGGGGAGGTCATCTGCGCCGCGCTCGACAGGCTCGCCAAGACGGGGGTGCCCATCTGGTTCACCGAGCTCGACGTGCCGGAGTACGACGTGGGCCTCCGCGCCAAGGACCTGGAGGTGGTGCTCCGGGAGGCGTACGCGCACCCGGCCGTGGAGGGCATCGTGTTCTGGGGCTTCATGCAGGGCACAATGTGGCGCCAGAACGCTTGGCTCGTCGACGCCGATGGCACCGTCAACGAGGCGGGCCAGATGTTCCTGAATCTGCAGAAGGAGTGGAAG 設計的引物 F:5' AGACCG GAATTC CGGACC TTGGACAACGCCTTC 3' 酶切位點 EcoRI GC含量57.6% TM值70.1 R:5' ATT GCGGCCGC TTA TCA CTTCCACTCCTTCTGC 3' 酶切位點 NotI GC含量54.5% TM值68.7 前后引物均加酶切位點和保護堿基 嘗試過退火溫度58-64均沒有P出來目的條帶還嘗試過55度也沒有p出來 不知道是什么原因 求各位大神指點，小妹不勝感激！ |
回復此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有144人回復
-
蛋白質(zhì)檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復
» 本主題相關商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 搶金幣啦！回帖就可以得到:
-
青島高校2026招生碩士研究生
+5/780
-
福建師范大學葉應祥課題組招收2026級博士研究生
+2/160
-
西北大學化學與材料科學學院博士招生（還有兩個名額，3月30日截至）
+1/63
-
湘潭大學化工學院國家級人才團隊2026年博士研究生招生
+1/60
-
加拿大阿爾伯塔大學招收電磁、無線通信、機器學習方向全獎碩士/博士/博士后/訪問學者
+1/53
-
PBAT溶解做成乳液
+1/38
-
0854電子信息調(diào)劑，閩南師大光電芯片研發(fā)實驗室，柯少穎教授課題組，集成電路
+1/35
-
上海交通大學沈道智副教授招收2026年聯(lián)培博士/碩士研究生（微納器件與制造方向）
+1/33
-
上海交通大學電催化方向博后招聘-有鋰電、高分子、燃料電池背景者優(yōu)先
+1/31
-
湖南大學微生物結(jié)構(gòu)與功能實驗室2026年計劃招收博士研究生
+1/15
-
西南某211招27屆博士
+1/13
-
【2026考研調(diào)劑】南方科技大學-深圳理工大學聯(lián)培 086000 免疫方向(26.9入學)
+1/12
-
湖北大學材料學招26級碩士研究生若干名
+1/11
-
新加坡國立大學藥學系化學生物學課題組招PhD
+1/6
-
26年申博自薦-計算機視覺
+1/5
-
【第三輪招生】澳科大誠招2026年秋季藥劑學碩士研究生（3月31日下午18:00截止）
+1/5
-
【科研干貨】納米抗體憑什么成為實驗室“新寵”？附優(yōu)質(zhì)制備服務商參考
+1/4
-
中國科學院過程工程研究所助理研究員（正式職工）和博士后招聘啟事
+1/3
-
211/雙一流石河子大學化學化工學院--電催化，CO2轉(zhuǎn)化
+1/3
-
求調(diào)劑｜一志愿廣東工業(yè)大學控制工程｜總分355｜本科電氣｜有項目/競賽/論文經(jīng)歷
+1/2
92樓2017-02-27 08:32:13
★ ★ ★ ★
艾喵喵(金幣+1): 謝謝參與
西門吹雪170: 金幣+3, 鼓勵回帖交流 2017-02-26 08:55:19
艾喵喵(金幣+1): 謝謝參與
西門吹雪170: 金幣+3, 鼓勵回帖交流 2017-02-26 08:55:19
|
設計的引物 F:5' AGACCG GAATTC CGGACC TTGGACAACGCCTTC 3' 酶切位點 EcoRI GC含量57.6% TM值70.1 R:5' ATT GCGGCCGC TTA TCA CTTCCACTCCTTCTGC 3' 酶切位點 NotI GC含量54.5% TM值68.7 你的引物設計的有問題 比如說R:5端 加酶切位點前后都加了保護堿基 ，而且你的保護堿基貌似也不對，有相應的表的，http://wenku.baidu.com/link?url= ... wp-DAwczvXc81arqjsy； 我感覺可以設計成這樣R：5- AAGGAAAAAAGCGGCCGC CTTCCACTCCTTCTGC 3-；同理F也一樣。 另外注意 (1)酶及其濃度； (2)模板(靶基因)核酸 模板核酸的量與純化程度，是PCR成敗與否的關鍵環(huán)節(jié)之一； |
5樓2017-02-25 18:00:54
7樓2017-02-25 18:08:15
簡單回復
低價核磁9樓
2017-02-25 18:10
回復
巨獸10樓
2017-02-25 18:11
回復
艾喵喵(金幣+1): 謝謝參與
^_^ 發(fā)自小木蟲IOS客戶端
重溫舊游13樓
2017-02-25 18:18
回復
艾喵喵(金幣+1): 謝謝參與
^_^ 發(fā)自小木蟲IOS客戶端
朝都14樓
2017-02-25 18:27
回復
艾喵喵(金幣+1): 謝謝參與
好 發(fā)自小木蟲Android客戶端
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | Ma_xt 2026-03-17 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 材料專業(yè)求調(diào)劑 +6 | hanamiko 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
[考研] 考研調(diào)劑求學校推薦 +3 | 伯樂29 2026-03-18 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑，一志愿:南京航空航天大學大學 ，080500材料科學與工程學碩，總分289分 +4 | @taotao 2026-03-19 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 本人考085602 化學工程 專碩 +19 | 不知道叫什么！ 2026-03-15 | 21/1050 |
|
|
|
[考研] 一志愿南理工085701環(huán)境302求調(diào)劑院校 +3 | 葵梓衛(wèi)隊 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 281求調(diào)劑（0805） +14 | 煙汐憶海 2026-03-16 | 25/1250 |
|
|
|
[考研] 一志愿中國海洋大學，生物學，301分，求調(diào)劑 +5 | 1孫悟空 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0703化學調(diào)劑 +4 | 18889395102 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 328求調(diào)劑，英語六級551，有科研經(jīng)歷 +4 | 生物工程調(diào)劑 2026-03-16 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 化學工程321分求調(diào)劑 +15 | 大米飯！ 2026-03-15 | 18/900 |
|
|
|
[考研] 材料專碩306英一數(shù)二 +10 | z1z2z3879 2026-03-16 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 301求調(diào)劑 +4 | A_JiXing 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 東南大學364求調(diào)劑 +5 | JasonYuiui 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿211 0703方向310分求調(diào)劑 +3 | 努力奮斗112 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +5 | 大米飯！ 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 中科院材料273求調(diào)劑 +4 | yzydy 2026-03-15 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085601材料工程315分求調(diào)劑 +3 | yang_0104 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 080500，材料學碩302分求調(diào)劑學校 +4 | 初識可樂 2026-03-14 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 中科大材料與化工319求調(diào)劑 +3 | 孟鑫材料 2026-03-14 | 3/150 |
|